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2-8℃
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99
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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10)
pH 0.2mol/L Tris(ml) 0.2mol/L HCl(ml) H2 O
】1. 消化缓冲液:100 mM NaCl,10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0),0.5% (w/v) SDS,0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存;2. 将 200 mg~1 g 的组织用预冷的研钵研碎,或用锤子将其捣为细粉末,每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮,然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
HCI调pH 值至8.7,定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液(0.5mol/L Tris-Hcl,pH6.8)Tris 6.06g ,适量水溶解,然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8,定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g,加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵,加水10ml溶解,现用现配,冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED(四甲基乙二胺)4℃,棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液(pH8.0)Tris 6.05g,甘油50ml,巯基乙醇25
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