氯化铵溶液;1mol/L;R28836-250ml

做好抗体标记，这4种方法你都用对了吗？

）配制浓度至少为1 ～3mg/ml 如果在抗体储存过程中添加叠氮钠，则必须在硼酸盐缓冲液中充分透析去除叠氮钠。 3.按25～100μg/mg将生物素酯加入抗体，在室温下均匀混合孵化4h。在完成组合反应之前DMSO最终浓度不得低于5 %，否则生物素酯会沉淀。高浓度的生物素酯会导致体上结合多个生物素分子，因此所有抗体都可能被标记。较低的比例将使生物素化保持在最低限度（25μg生物素酯/mg摩尔比最初是抗体10:1）。 4.每250μg添加生物素酯20μl1mol/L氯化铵，室温孵化10min 

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

有黑点。 方法4 免疫印迹 1样品制备和蛋白定量 1.1 容液配制 10ml100mmol/L PMSF:0.1742g溶于10ml的异丙醇中,至与4?C保存。 50ml 5mol/L NaCl:14.61g溶于40ml三蒸水中，定容至50ml。 100ml 20% SDS:20g溶于80ml水中，加热溶解，定容至100ml。 100ml 1mol/LTris-HCl: 12.114g溶于80ml三蒸水中，定容至100ml。 配RIPA裂解

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

ml，溴酚蓝0.5g，SDS l0g，溶于水，用HCI调PH至8.0，定容至500ml。( 11)脱色液 甲醇：乙酸：水＝5：1 ：5（体积比）( 12)染色液（0.25%考马斯亮蓝R250）1.00g考马斯亮蓝R250，用脱色液400ml溶解，过滤备用。( 13)低分子质量标准蛋白溶液，包括溶菌酶（MW=14400Da）大豆胰蛋白酶抑制剂（215000）、碳酸酐酶（310000）、卵白蛋白（450000）、牛血清白蛋白 (662000）、磷酸化酶B (925000）。用样品缓冲液配成2mg/ml