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KLHL9基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液;K35935-500μl
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- 详细信息
- 文献和实验
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RT
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99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500ml
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文献和实验,最后加入二甲酸钠缓冲液至1000ml充分混合。对苯醌与戊二醛及甲醛联合应用,即可阻止醛基对抗原的损害,又不影响超微结构的保存,故适于多种类抗原的免疫细胞化学,尤其是免疫电镜的研究。9、碳二亚酰胺-戊二醛(ECD-G)液试剂:0.05mol/L PB500ml0.01mol/L PBS500mlTris14g浓HCl 少许ECD 10g25%戊二醛3.5ml配制方法:先以约500ml的PB与相同体积的PBS混合,加入Tris(使其终浓度为1.4%)溶解,以浓HCl调pH至7.0,再将事先称取好的
体系,常用的有TBE(0.08mol/L Tris·HCl,pH8.5,0.08mol/L硼酸,0.0024mol/L EDTA)和THE(0.04mol/L Tris·HCl。pH7.8,0.2mol/L醋酸钠,0.0018mol/L EDTA)。⑵凝胶制备:用上述缓冲液配制0.5%~0.8%琼脂糖凝胶溶液,沸水浴或微波炉加热使之融化,冷至55℃时加入溴化乙锭(EB)至终浓度为0.5μg/ml,然后将其注入玻璃板或有机玻璃板组装好的模子中,厚度依样品浓度而定。注胶时,梳齿下端距玻璃板0.5~1.0mm
g,在2~5℃下解冻,切成小块,用组织捣碎机中绞碎成胰浆,在5~10℃存放24h以上,使胰酶自身活化。胰浆中加入25%(质量分数)乙醇溶液250mL(25%乙醇溶液中加0.015mol/L HCl 、0.05mol/L CaCl 2 ),捣碎机中捣碎1min。胰浆倒入500mL 烧杯 中,间隙搅拌,温度20℃左右,活化5~6h。每隔1.5h,吸取2mL活化液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。活化反应结束后,胰浆3 500 r/min离心20min,将离
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