碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液;0.1mol/L,pH8.6;R28

荧光素FITC标记抗体的方法

r／min)20rain，除去其中少量的沉淀物，装入透析袋中，再置于烧杯中，用pH8．0缓冲盐水透析(0～4~C)过夜。⑤过柱 取透析过夜的标记物，通过葡聚糖凝胶SephadexG-25或G—50柱，分离游离荧光素，收集标记的荧光抗体进行鉴定。洗脱液：0．01mol／L磷酸盐缓冲液(pH7．2)；过滤量：12ml标记全球蛋白液(过滤前未透析)；收集量：20ml(稀释1．7倍左右)。2．Chadwick法(1)试剂和材料 抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%碳酸钠水溶液、0．01mol/L

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

HCI调pH 值至8.7，定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-Hcl，pH6.8）Tris 6.06g ，适量水溶解，然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8，定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g，加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵，加水10ml溶解，现用现配，冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED（四甲基乙二胺）4℃，棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液（pH8.0）Tris 6.05g，甘油50ml，巯基乙醇25

做好抗体标记，这4种方法你都用对了吗？

。按厂家说明准备滤柱，用 20 双柱床体积 PBS 注入滤柱，直到缓冲液水平刚刚降低到柱床顶部，关闭滤纸底部的阀门或使用塑料粘土(或 parafilm ）封闭底部，使滤柱不再流动。 2.用0.1mol/L 硼酸钠或碳酸钠的制备浓度至少为 2mg/ml 的抗体溶液（pH9.0）。含一级胺的外来分子应避免引入。 3.用无水DMSO 溶解(优级纯) FITC或TRITC至1mg/ml。每次标记反应时需即时配置。 4.每 1ml 蛋白溶液加50ul染液，每次都要5ul 慢慢加入，加入时应轻轻连续搅拌