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99
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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验r/min)20rain,除去其中少量的沉淀物,装入透析袋中,再置于烧杯中,用pH8.0缓冲盐水透析(0~4~C)过夜。⑤过柱 取透析过夜的标记物,通过葡聚糖凝胶SephadexG-25或G—50柱,分离游离荧光素,收集标记的荧光抗体进行鉴定。洗脱液:0.01mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.2);过滤量:12ml标记全球蛋白液(过滤前未透析);收集量:20ml(稀释1.7倍左右)。2.Chadwick法(1)试剂和材料 抗体球蛋白溶液、异硫氰酸荧光素、3%碳酸钠水溶液、0.01mol/L
剂,以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续
.0) 取氯化铵5.4g,加水20 ml溶解后,加浓氯溶液35 ml,再加水稀释至100 ml,即得。 硼砂―氯化钙缓冲液(PH8.0) 取硼砂0.572 g与氯化钙2.94 g,加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5 ml 调节PH值至8.0,加水稀释至1000 ml即得。 硼砂―碳酸钠缓冲液(PH10.8~11.2) 取无水碳酸钠5.30 g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91 g,加水使溶解成100 ml 临用前取碳酸钠溶液973 mol/L与硼砂溶液27 ml
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