PBS磷酸盐缓冲液;0.1mol/L，PH1.0;R2829

免疫细胞化学常用试剂

.8g，加蒸馏水至1000ml，使0.2mol/L的二甲胂酸钠溶液；再取HCl 1.7ml加蒸馏水至1000ml ，配成0.1N，最后 取0.2mol/L二甲胂酸钠溶液500ml及0.1n HCl 28ml混合，加蒸馏水至1000ml，即为0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液。 8、几种常用的不同pH值缓冲液的配制表 （1）0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH5.7~8.0） （2）0.05mol/L Tris-HCl缓冲液（pH7.19~9.10） （3）0.2mol/L醋酸盐缓冲

【专题讨论】新手做WB的几张片子，请各位高人指点。

：蛋白质样本和生物素标记的蛋白marker标准经SDS-PAGE后转于印迹膜上，然后经一抗→HRP 标记的二抗→HRP催化LumiGLO试剂发生反应并产生荧光→显影于X-光片上。其基本原理如下图： 3.1 主要试剂配制 10×转移缓冲液(transfer buffer)：30.3 gTris-Base，144.1 g Glycine，500 ml三蒸水，振荡混匀后，定容至1000 ml，4℃备用。用时用0.1 M磷酸缓冲液即1×PBS和甲醇稀释至1倍，使甲醇的终浓度

Fab片段抗体表达产物的纯化和鉴定

/L甘氨酸(pH值6.0)、0.2mol/L甘氨酸(pH值5.0)。    5) 用3倍柱床体积的0.2mol/L甘氨酸(pH值3.0)洗脱液洗脱，每管收集1ml，加200ml 1mol/L TrisHCl(pH值7.4)中和。    6) 将洗脱下来的抗体对PBS透析过夜。 3. 金属离子亲和层析柱纯化法此方法可用于带有6个组氨酸的重组抗体。    1) 抗体溶液制备，如从上清中收获抗体片断，10 000r/min离心15min，用PEG浓缩或用超滤