磷酸钾缓冲液;0.1mol/L,pH6.4;R27780-5

大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用

-LB液体培养基，37o C，300 rpm振荡培养转化子至对数生长期。     2) 用0.5 mM IPTG诱导6小时，取出20ul培养液，加入等体积的SDS-PAGE上样缓冲液，100o C煮沸10分钟，离心取上清液进行SDS-PAGE检查转化子中各变种酶基因的表达情况。     3) 将高表达转化子5 mL菌液转接至500 mL氨苄- LB液体培养基中37 o C，300 rpm培养至对数生长期，用0.5 mM IPTG诱导8小时，收集菌体。    

种子蛋白质系统分析：（SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法）

HCI调pH 值至8.7，定容至100ml 。( 6)浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-Hcl，pH6.8）Tris 6.06g ，适量水溶解，然后用1mol/L HCI 调pH值至6.8，定容至l00ml。( 7 ) 10%SDS SDS1g，加水10ml溶解。( 8 ) 10%过硫酸铵 1g过硫酸铵，加水10ml溶解，现用现配，冰箱中最多可贮存一周。( 9 ) TEMED（四甲基乙二胺）4℃，棕色瓶中贮存。( 10)样品缓冲液（pH8.0）Tris 6.05g，甘油50ml，巯基乙醇25

免疫细胞化学常用试剂

剂，以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3）多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法：称取40g多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液（Phosphate Buffer以下简称PB），加热至60℃左右，持续搅拌（或磁力搅拌）使粉末完全溶解，通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮，最后补足0.1mol/L的PB于1000ml，充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究，最好是动物经灌注固定取材后，继续