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2-8℃
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99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- 规格:
500ml
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文献和实验DNase I buffer 1 μ l DEPC 处理的ddH2O 5 μ l 4. 37 ℃ 保温15 min, 然后70 ℃ 保温10 min. 。 反转录反应 1. 加1μl 500 μ g / ml oligo (dT)15 primer, 涡旋混合,简单离心。 2.在65 ℃加热混合物10 分钟, 然后室温10 分钟,再分别加入下列试剂:5 × 第一链缓冲液4μl、0.1 M DTT 2μl、 10 m M dNTP 1μl 3.涡旋混合后,简单离心,37℃水浴
地提取核。细胞核是平均直径 20 μm 的均匀球体。豌豆细胞核同样是平均直径 20~30 μm 的均匀球体,但拟南芥的细胞核直径更小 ( 5~10 μm) 且不是球形。在植物中,已有关于水稻和拟南芥细胞核蛋白质组成分的报道。在水稻中,利用双向电泳分辨出了等电点为 4~10 的 549 个核蛋白。此结果与 Bae 等报道的拟南芥核蛋白的工作一致;他们检测到了等电点为 3~10 的 544 个蛋白质。2. 材料 ( 1 ) 用于分离核蛋白的水稻悬浮细胞培养于含有 1 ml/L 2, 4-二
)。 2.3 试剂 1. 产品和液体贮存液 ( 1 ) 葡聚糖 T-500 和聚乙二醇(PEG ) 3350 分别购自 Amersham 和 Union Carbide。根据分子质量分别配制 20% 和 40% 的葡聚糖 T-500 和 PEG 3350 的贮存液(见注释 1)。 ( 2 ) 0.2 mol/L 的二水 EDTA 钠盐(的 EDTA - Na2) 贮存液的配置:500 ml 的水 ( 终体积)溶解 37.2 g 的 EDTA -Na2。在粉末中用 Trizma 碱(Sigma
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