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RT
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99
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上海源叶生物科技有限公司
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500ml
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文献和实验.8g,加蒸馏水至1000ml,使0.2mol/L的二甲胂酸钠溶液;再取HCl 1.7ml加蒸馏水至1000ml ,配成0.1N,最后 取0.2mol/L二甲胂酸钠溶液500ml及0.1n HCl 28ml混合,加蒸馏水至1000ml,即为0.1mol/L的二甲胂酸钠缓冲液。 8、几种常用的不同pH值缓冲液的配制表 (1)0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0) (2)0.05mol/L Tris-HCl缓冲液(pH7.19~9.10) (3)0.2mol/L醋酸盐缓冲
-Cl, pH8.0 1.2114 20% (v/v) Glycerol 20g 4% (w/v) SDS 4g 0.2% Bromophenol blue 0.2g 200mM DTT 20ul 5x Running buffer: 1 L 15.1 g Trizma base (= 125m M) 94g Glycine (= 1.25 M) 50ml 10%SDS (= 0.5%)--add last Do not adjust the pH!! 10x Blotting
菌种接种于 500 mL LB 培养液 (含用于筛选的抗生素) 中,37 ℃ 以 225 rpm 速度振荡培养 12~16 小时;2. 10,000 rpm,4 ℃ 离心 15 min 收集菌体;3. 将细菌悬浮于 100 mL 预冷的 STE(0.1M NaCl,10 mM Tris.Cl,pH8.0,1 mM EDTA,pH8.0)中,12,000rpm 离心收集菌体;4. 将菌体悬于 10 mL 细菌悬浮液中,再移至 50 mL 离心管中;5. 加入 1 mL 用 10 mM Tris.Cl (pH
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