Scopine Hydrochloride;85700-55

制备高效率感受态的方法

PIPES 3.0G 10mM 　　CaCl2.2H2O 2.2g 15mM 　　KCl 18.6g 250mM 　　add water up to 950ml 　　用 5N KOH 调PH至6.7-6.8*低PH不溶 　　在加终浓度未55mM的MnCl2.4H2O 10.9g 　　定溶到1升, 过滤灭菌, 4度保存. 　　但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且这种方法不适

人APC和TSC－2 cDNA的长5＇RACE

 图2 APC 5＇末端的扩增。用对应APC mRNA的位置5846的GSP反转录1mg Hela总RNA得到APC mRNA。cDNA被纯化、加尾，和用对应位置1797（A带）和位置1632（B带）的引物和AAP一起，用ELONGASE酶混合物来扩增（94℃ 30s，接着35个循环的94℃ 15 s，55℃ 30 s，68℃ 5 min）。初步PCR用TE缓冲液稀释100倍，取1ml用引物APC－1632（A带）或引物APC－1242（B带）和AUAP分别重新扩增（30个循环），每个PCR

RNA-biotin based pulldown assays for the detection of siRNA targeted genomic regions and siRNA directed histone modifications (PROT32)

H20 ChIP elution buffer       20ml final volume:       500µl 2M Tris       2ml 10% SDS       400µl 0.5M EDTA       17.1ml H2O cold lysis buffer       1mM PMSF       20units RNasin       10mM Tris-HCl pH 7.4       10mM NaCl       3mM MgCl2