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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT
- 英文名:
2-Amino-4-(Trifluoromethyl)Thiophenol Hydrochloride
- 库存:
99
- 供应商:
上海源叶生物科技有限公司
- CAS号:
4274-38-8
- 规格:
1g
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文献和实验各有缺点。近来这一问题通过将来自B.subtilis编码醋酸盐合成酶的alsS基因导入E.coli细胞中得以解决[141]。该酶催化丙酮酸转化为非酸性和低毒性的副产品。乙酸积累的减少极大地改善了重组蛋白的产生。另外,其他酶缺陷的E.coli突变株也已经建立,这些突变株产生较少的乙酸,从而提高了人重组蛋白的表达水平[214]。 总结 一种高效的原核表达载体需要包括一个强大并且可以严紧调节的启动子;一位于翻译起始密码子5’端大约9bp的SD序列;位于目的基因3’末端的一个高效转录终止子。除此之外
化位点明确,实验结果易解释;缺点是:1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中,因此非该序列中的CG将被忽略;2.只有检测与转录相关的关键性位点的甲基化状态时,该检测方法的结果才有意义;3.相对而言,Southern方法较复杂,且需要样本的量大;4.存在着酶不完全消化引起的假阳性的问题;5.不适用于混合样本。 2.2.2 直接测序法 直接测序是由Frommer等[25]提出的研究DNA甲基化方法。过程是:重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(见图
)。 ( 7 ) Luria- Bertam 培养基:10 g 胰蛋白胨、5 g 酵母抽提物和 10 g 氯化钠,加水至终体积 1 L。 ( 8 ) 氨苄青霉素。 ( 9 ) 异丙基-β-D-硫代-吡喃半乳糖苷(IPTG )。 ( 10 ) 超声裂解设备。 ( 11 ) 磷酸缓冲生理盐水(PBS): 10 mmol/L 磷酸缓冲液,pH 7.6,130 mmol/L 氯化钠和 2.7 mmol/L 氯化钾。 ( 12 ) 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 设备
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