羟乙基磺酸钠(SHES);1562-00-1;10mM in

cDNA文库组标准流程

I adaptor 加接 : 1. 往双链cDNA沉淀中加入9μl EcoR I adaptor(400ng/μl)，4℃至少放置30分钟以充分溶解cDNA沉淀; 2. 溶解完成后，顺序加入下列试剂: 1.2μl   10×Ligase Buffer 1μl    10mM rATP 1μl    T4 DNA Ligase(4U/μl) 3. 混匀后，4℃连接3days，或者8℃过夜连接;五、双链 cDNA 末端的磷酸化及 Xho I 酶切 : 1. 连接反应完成后,将反应体系70℃放置15

生物大分子的离心分离实例

。 　　（ xiii ）将已知构型及浓度的 RNA 在 -20 ℃ 储存。 例（ 5 ）：用 KI 梯度分离 RNA 片断。 　　（ i ） 将 DNA 样品溶于 15mM 柠檬酸钠， 10mM 亚硫酸钠， 5mML 磷酸钠（ PH7.0 ）中，最终浓度不超过 50 μ g/ml 。 　　（ ii ） 每毫升 RNA 溶液加入 1.0 克 KI ，充分溶解后用折射仪测定 RI=1.4290 ，如过高，过低必须修正到比值。 　　（ iii ） 将以上溶液充满 12ml ， PA 快速密封离心管，密封

关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结

SDS-PAGE从胶中纯化蛋白质浸提液母液：0.5 mol/L Tris-CI pH 7.91.0 mmol/L EDTA1.5 mol/L NaCL1.0 % SDS上述各取1ml 混匀，加入6 ml 水，混匀，即为10ml 浸提液。回收蛋白方法：1. 使用厚胶，设两个样品孔，一个为蛋白marker，另一为样品。2. 电泳结束后，将Marker和少许样品带切下，进行染色和脱色。剩余样品胶置于4 ℃。3. 根据Marker和被染色的样品带，切下未被染色的胶中蛋白带。4. 称重，研碎，加入3～