氟草肟;88485-37-4;95%;T65046-50mg

目的基因片段的PCR扩增与克隆

1.PCR技术PolymeraseChainReaction聚合酶链反应它是一种模拟天然DNA复制过程，在有DNA模板、DNA聚合酶（Taq酶）、RNA引物和四种dNTP的情况下，通过高温变性（90℃－95℃，1－2min）,低温退火（25℃－37℃，1－2min）,中温延伸（60℃－75℃，90sec-5min）,这样反复循环的过程中，在体外扩增特异性DNA片段的分子生物学技术。1）、PCR反应成分： TaqDNA聚合酶引物浓度：一般0.1-0.5μmol/LdNTP:一般为50－200μ

分子实验方法10: 测序技术

钠（Na2CO3)溶于2升超纯水中，使用前加3ml 37% 甲醛和 40ml硫代硫酸钠溶液（10mg/ml)。（10）95%乙醇。（11）0.5%冰乙酸。（12）Sigmacote (Sigma CAT. #SL-2)。五、操作步骤： 成功地使用银染测序系统需要对提供的操作方法进行仔细考虑。银染不如放射性检测法灵敏，而需要更多的模板量，此外，也不可能通过延长X-光胶片曝光时间的方法增加信号强度。因此，请使用推荐的DNA 模板量，每次均使用所提供的对照检查系统的可靠性，并且注意如下几点

T7 DNA聚合酶测序技术

苄的TYP肉汤培养基中，在37℃振荡过夜 （2）取100ml过夜培养物接种到另一新的装有5ml含50mg/ml Amp的TYP肉汁培养基的试管中，在37℃强烈振荡30分钟。 （3）加40μl辅助噬菌体R408或M13 K07，继续剧烈搅拌振荡培养6～8小时，使辅助噬菌体超感染。 （4）12000g离心15分钟后，去除沉淀，取上清，转移到一新eppendorf管中再次离心15分钟，小心地取1～1.2ml上清液（注意不能触及沉淀）。 （5）将0.25体积的含20%PEG的3.75M醋酸铵加入上清