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RT
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见标签
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999
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鹿森生物
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5G

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文献和实验实验试剂 1. 聚苯乙烯塑料微量组织培养板:4×10孔。 2. 包被液(pH9.6):NaHCO3 29.3g、Na2 CO3 19.5g,蒸馏水加至1000ml,置4℃保存。 3. 洗涤液(0.01mol/L、pH7.4PBS):NaCl 8.0g、KH2 PO4 0.2g、Na2 HPO4 •12 H2 O 2.9g、KCl 0.2g、Tween20 0.5ml,加蒸馏水至1000ml。
检测系统中。 另一种固定技术是发光活性物质或酶直接固定在电极表面,固定的方法有静电吸附、共价结合、电化学聚合、光聚合和包埋等,使用的固定物有导电高分子聚合物如聚吡咯和聚苯胺、类脂膜如磷脂、溶胶--凝胶及天然高分子化合物如壳聚糖等,不仅使较昂贵的发光活性物质或生物酶能够重复使用,还提高了电致化学发光分析方法的效率。赵志常等用壳聚糖和溶胶--凝胶包埋三联吡啶合钌制成复合膜电极,用ECL方法测定了内氨酸等8种物质的特异发光电压;Leca等将维生素B氧化酶用二乙氨乙基修饰的聚合物通过光聚作用固定
,该方法自问世以来已被广泛用于差异表达基因的克隆鉴定研究中。其基本原理是,几乎所有的真核基因mRNA分子的3’-末端,都带有一个多聚的腺苷酸结构,即通常所说的poly(A)尾巴。因此,在RNA聚合酶的作用下,可按mRNA为模板,以oligo(dT)为引物合成出cDNA拷贝。根据mRNA分子3’-末端序列末端结构的分析可以看到,在这段poly(A)序列起点碱基之前的一个碱基,除了为A的情况之外,只能有C、G、T三种可能。根据这种序列结构特征,P. Peng等人设计合成三中不同的下游引物,它由11个或12
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