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鹿森生物
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100mg

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文献和实验DNA ,RAPD) 技术对以上缺点有所改善,并具有样品用量少、灵敏度高、检测容易等优点。本研究旨在利用RAPD 技术对临床分离的20 株猪链球菌进行分型研究。 1 材料与方法 1. 1 菌株 供试菌株来源于发病猪场、小动物门诊及黑龙江八一农垦大学动物科技学院微生物教研室。所分离菌株均经形态学、生化试验和血清学试验鉴定证实,菌株编号为1~20。 1. 2 试剂 琼脂糖、PCR Buffer (含Mg
5.6。 ( 7 ) MS7(生根培养基):2.15 g/L MS 培养基,10 g/L 蔗糖,15 mg/L 草胺膦或 5 mg/L 双丙氨膦,3~5 g/L phytagel,pH 5.8。 ( 8 ) MS8(盐胁迫培养基):2.15 g/L MS 培养基,10 g/L 蔗糖,100 mmol/L NaCl (Sigma),3~5 g/L phytagel, pH 5.8。 ( 9 ) MS9(渗透胁迫培养基):2.15 g/L MS 培养基,10 g/L 蔗糖,200 mmol/L
5 分钟,并进行分装。在 -20 °C 下保存裂解物。注意:分装细胞裂解物 (50 - 100 μL),避免反复冻融循环。4. 在 37 ℃ 下解冻装有细胞裂解物的离心管。在微型离心机中以 16,000 × g 离心 5 分钟。三、上样和电泳1. 将等量的蛋白质和分子量标准上样到 SDS-PAGE 凝胶孔中。来源于细胞裂解物或组织匀浆的总蛋白的上样量为 20 - 30 μg,纯化蛋白的上样量为 10 - 100 ng。2. 在 100 V 下电泳 1 至 2 小时。可能需要对时间和电压进行一些优化
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