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999
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联硕生物
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5G

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文献和实验。所有的细胞均培养在5% CO2,37°C的培养箱中,NK92和mNK细胞在含有2 mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.2 mM肌醇,0.1 mM 2-巯基乙醇,0.02 mM叶酸,12.5%马血清,12.5% FBS,100-200 U/ml IL-2重组体的Alpha MEM培养基中培养。其它癌细胞培养在含有5% FBS,1%青霉素,1%螺旋霉素(GIBCO)的RPMI培养基中。NIH 3T3细胞培养在含有10%FBS,1%青霉素,和1%螺旋霉素的DMEM培养基中。 细胞溶解分析
0.5g溶于10ml 100%的DMF内,混匀。4℃或分装存于-20℃,用前恢复至室温。 C.显色液:取A液40ul,加入到盛有10ml的0.1mol/l Tris-HCl(pH9.5,钤0.1mol/L NaCl、5mmol/L MgCl2)管内,充分混匀;再加入B液40ul,轻轻混合即可。最好用前新鲜配制。 NBT即四唑氮蓝(Nitro-Blue-Tetrazolium),MW=818,为深蓝色无定形微溶物质。BCIP即5-溴-4-氯-3-吲哚-磷酸盐(5-bromo-4-chloro
在分子生物学研究中,DNA 的序列分析是进一步研究和改造目的基因的基础。目前用于测序的技术主要有Sanger等(1977)发明的双脱氧链末端终止法和Maxam和 Gilbert(1977)发明的化学降解法。这二种方法在原理上差异很大,但都是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生A,T,C,G四组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的PAGE胶上电泳进行检测,从而获得DNA 序列。目前Sanger测序法得到了广泛的应用。Sanger 法测序的原理就是利用一种DNA
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