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- 详细信息
- 文献和实验
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RT
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见标签
- 库存:
999
- 供应商:
联硕生物
- CAS号:
94367-21-2
- 规格:
10MG
一般描述
用作胰凝乳蛋白酶样酶的荧光底物,例如组织蛋白酶B和钙蛋白酶,其与程序性细胞死亡有关。
应用
用N-琥珀酰-亮氨酸-缬氨酸-酪氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素测定水稻Jurkat细胞裂解液6和粗细胞裂解液中蛋白酶体类糜蛋白酶活性。
生化/生理作用
在存在胰凝乳蛋白酶样酶活性的情况下,荧光团,7-氨基-4-甲基香豆素是从N-琥珀酰-亮氨酸-缬氨酸-酪氨酸-7-氨基-4-甲基香豆素中释放的。所获得的荧光可作为酶活性的量度。
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文献和实验,在pH=7的磷酸缓冲液中,巯基与硫酯基生成共价的硫内酯,这种硫内酯自发地经过S原子到N原子酰基迁移而形成环肽,如图: 作者应用上述方法合成了一系列N端为半胱氨酸的Cyclo(Cys-Tyr-Gly-Xaa-Yaa-Leu),为了防止二硫桥的形成和加速环合反应的进行,反应过程中加入TCEP(三羧基乙基膦),反应时间约为4小时,收率在78%~92%之间,HPLC检测未发现副反应和低聚物。 对于不含半胱氨酸的线性多肽的环合,采用亲硫的Ag+离子辅助配位柔性的线性多肽的N端氨基与C端硫酯形成一个环状
Tyr Tyrosine TAT,TAC Z Glu,Gln Glutamic, Glutamine GAA,GAG,CAA,CAG * End Terminator TAA,TAG,TGA Standard Genetic Code U C A G U UUU Phe F UUC Phe F UUA Leu L UUG Leu L UCU Ser S UCC Ser S UCA Ser S UCG Ser S UAU Tyr Y UAC Tyr Y UAA Stop UAG Stop UGU
Proteasome Preparation from Human Brain
ml 50mM DTT 2ml Make up volume to 100ml with dd water Chymotrypsin substrate stock (100x) 10 mM N-Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-7 amidomethyl coumarin (5mg/650ul DMSO). Working chymotrypsin substrate solution
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