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999
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鹿森生物
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10G

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文献和实验,10 min 收集细胞,然后换为新的不含外泌体的培养基或者无血清替代培养基继续培养 24-48 小时,根据细胞的生长速度确定收取上清时间; 3)收集细胞上清,300 g,4°C,离心 10 min,小心收集上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片; 4)3000 g,4°C,再次离心 15 min,确保将细胞或者细胞碎片去除干净; 5)取上清,注意避免吸入细胞或者细胞碎片,合并相同的细胞培养液上清样品,装入无菌容器,可在 4°C 短期保存(1-2 天),长期保存可冻存于-80°C。建议细胞上清分离后尽快
Nature 解读:David R. Liu 等通过体内碱基编辑实现治疗小鼠Hutchinson-Gilford早衰综合征
注射 ABE 的小鼠(n=11)的中位生存期为 337 天(1.8 倍)。P14 生理盐水注射小鼠(n=12)的中位生存期为 215 天,而 P14 ABE 治疗小鼠(n=10)的中位生存期为 510 天(2.4 倍)。图片来源:NatureDavid R. Liu 教授的研究表明,ABE 作为一种在无需断裂双链 DNA 的情况下,可将基因中 A・T 碱基对转化为 G・C 碱基对的基因编辑手段,可直接纠正 HGPS 体内的致病突变,为 HGPS 提供了新的治疗方法。参考文献:1. Koblan
,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
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