胸苷，89270-1G

体外哺乳动物细胞 TK 基因突变试验方法及导则

TK 基因突变试验的检测终点是 TK 基因的突变。TK 基因突变属于常染色体基因突变。TK 基因的产物胸苷激酶在体内催化从脱氧胸苷（TdR）生成胸苷酸（TMP）的反应。在正常情况下，此反应并非生命所必需，原因是体内的 TMP 主要来自于脱氧尿嘧啶核苷酸（dUMP），即由胸苷酸合成酶催化的 dUMP 甲基化反应生成 TMP。但如在细胞培养物中加入胸苷类似物（如三氟胸苷，即 trifluorothymidine，TFT），则 TFT 在胸苷激酶的催化下可生成三氟胸苷酸，进而掺入 DNA，造成致死

合适的小鼠胚胎干细胞胞质分裂阻断微核试验（CBMn）分析

7. 胸苷的制备    1) 0.1816克胸苷粉末溶解在10mlPBS得到75 mM的胸苷溶液(原液)。    2) 加入100μL原溶液至3毫升培养基(胸苷最终浓度为2.5mM)。 mESC培养基制备： 1．普通的培养条件， ES(胚胎干)细胞生长于 Mit-C((M0503；Sigma，Germany)，将未分裂小鼠胚胎成纤维细胞(mEF)作为饲养细胞培养于涂有明胶(G2500；Sigma)的组织培养瓶((90025；TPP)。

常用蛋白标签、序列及特性

常见表位标签和序列常用表位标签的生物化学特性总结如下：氯霉素乙酰转移酶（CAT）这个 24kDa 大小的标签也用作报道基因，与大多数蛋白质融合时依然能保留其活性。这意味着它可以用来直接测量表达水平，而不需要 PAGE 或免疫检测。二氢叶酸还原酶（DHFR）这个 25kDa 蛋白质参与胸苷生物合成途径。带有这个标签的蛋白质的纯化可以通过甲氨蝶呤连接的树脂实现。FLAG带电的八肽序列（DYKDDDDK），可用于蛋白检测，特别是在串联为 3xFLAG™表位（DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDK