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999
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联硕生物
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100MG
Application
5-氯-2′-脱氧尿苷已用于:
利用动物模型,通过免疫组化分析和双S期标记研究细胞周期动力学[1]
使用动物模型分析细胞周期长度[2]
标记HEK293T细胞进行分子梳理试验[3]
Biochem/physiol Actions
用5-氯-2′-脱氧尿苷(CldU)标记的DNA是分析和量化DNA复制、修复和重组的有效工具。[4]CldU是一种有效的诱变剂、分裂剂和毒物。[5]它被用作胸腺嘧啶类似物,并被发现改变dNTP池,可能导致细胞周期停滞。[4]CldU产生姐妹染色单体交换,但与其他胸腺嘧啶类似物相比,对电离辐射的响应较小。[5]5-氯-2′-脱氧尿苷(CldU,氯脱氧尿苷)用于研究DNA和DNA前体的次氯酸损伤引起碱基错配的潜在可能。在识别DNA复制位点的实验方案中,5-氯-2′-脱氧尿苷(CldU)可掺入DNA以便通过CldU抗体进行后续的免疫荧光成像。氯脱氧尿苷可与其他卤化尿苷,如碘脱氧尿苷(IdU),共同作为标记底物使用。
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文献和实验与 TritonX100 等细胞通透剂。 2. 蛋白酶K一般工作液浓度为 20 μg/ml,亦可自行将浓缩液配制1-10 mg/ml。蛋白酶K可用 PBS 配制,也可用蛋白酶K缓冲液(100 mM Tris HCl pH8.0, 50 mM EDTA),分装后-20ºC保存。 3. 蛋白酶K反应时间一般为10-30 min,具体时间长短与切片厚薄有关,4 μm左右的片子可以通透 10 min,如切片厚度30 μm左右的可延长至30 min,需实验摸索最佳时间。通透时间过长易脱片、过短起不到通透效果。 四
性由两个人工合成的引物序列决定。反应分三步: A.变性:通过加热使 DNA 双螺旋的氢键断裂,形成单链 DNA; B.退火:将反应混合液冷却至某一温度,使引物与模板结合。 C.延伸:在 DNA 聚合酶和 dNTPs 及 Mg2+存在下,退火引物沿 5‘ —— 3’ 方向延伸。 以上三步为一个循环,如此反复。 3. 逆转录酶和 RT-PCR 逆转录酶(reverse transcriptase)是存在于 RNA 病毒体内的依赖 RNA 的 DNA 聚合酶,至少具有以下三种活性: (1)依赖 RNA
(1~2meq/kg);先麻醉,之后断头;先麻醉,之后颈椎脱臼;B动物清醒中直接断头;动物清醒中直接颈椎脱臼;乙醚;C电击。2、125g~1kg啮齿动物、兔A二氧化碳;Barbiturate注射液,静脉注射(100mg/kg);Barbiturate注射液,腹腔注射(100mg/kg);先麻醉,之后采血致死;先麻醉,之后静脉注射KCl(1~2meq/kg);先麻醉,之后断头;先麻醉,之后颈椎脱臼;B动物清醒中直接断头;C动物清醒中直接颈椎脱臼;乙醚;电击。3、1kg~5kg啮齿动物、兔A二氧
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