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RT
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见标签
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999
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鹿森生物
- 规格:
100MG

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文献和实验或者 Mowiol 封片。 氨乙基咔唑 氨乙基咔唑(AEC)产生红色产物,其敏感性低于 DAB,但可用于 DAB 反应产生较高背景或要求改变产物颜色的实验。此产物可溶于醇,但不溶于水。 1. 需要的溶液和特殊设备 0.4% AEC用 N,N —二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L 乙酸钠缓冲液(pH5.2),过氧化氢, Gelvatol 或 Mowiol,光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果)。 2. 操作步骤 (1) 用 l mL DMF 溶解 4 mg AEC。AEC
加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个,否则难以反应真实情况3.5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。4.每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。5.终止培养,小心吸去孔内培养液。6.每孔加入150ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物充分溶解。在酶联
液(pH3.6~5.6) 注:HCI可由NCO3代替,配制成二甲胂酸钠-HNO3缓冲液。 (5)0.2mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.2~10.7) 三、显色液 免疫细胞化学中,由于抗原-抗体反应所形成的复合物本身无色,无法直接观察,因而需借助于某些化学基团的呈色作用,使其得以显示,以利于在显微镜下观察。常用的显色液有: 1、DAB(Diaminobenzidine)显色液 DAB即3,3-二氨基苯联胺 试剂:DAB(常用四盐酸盐) 50mg 0.05mol/L TB
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