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RT
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见标签
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999
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联硕生物
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10G

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文献和实验;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
过硫酸胺 0.1 g ,加超纯水1.0 mL 溶解后,4 ℃ 保存,保存时间为 1 周。(-20 ℃长期保存) 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中,定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS(2L) NaOH 调 pH 值至 7.4,定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后,分装于 1.5 mL 离心管中,4 ℃ 可保存数周,-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存,1 次溶液可重复
萘酚贮存液的准备:用 10 mL 无水乙醇溶解 0.3 g 氯萘酚,贮存于 -20℃; (2) 加 100 μL 氯萘酚贮存液至 10 mL 0.05 mol/LTris(pH7.6); (3) 加0.1 mL 3% 过氧化氢于水中。过氧化氢一般是以 30% 的溶液提供,4℃ 可存放 1 个月; (4) 白色沉淀可用滤纸过滤去除; (5) 加此溶液到标本中,并在室温孵育 10~40 min,水洗终止反应; (6) 优化:如果需要,进行复染,但只可使用水溶性染料; (7) 用 Gelvatol
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