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RT
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见标签
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999
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联硕生物
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25ML

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文献和实验)。将此溶液及 CTAB/NaCl 溶液加热至 65 ℃。对于每克新鲜的叶组织大约需要 4 mL 的 2-巯基乙醇/CTAB 抽提液和 0.4~0.5 mL 的 CTAB/NaCl 溶液;2. 用液氮 (-196 ℃) 或干冰 (-78 ℃) 冷冻匀浆器,将植物组织粉碎成为细粉,然后将冷冻的组织转移到一个含有机溶剂的试管或烧瓶中;3. 往粉碎的组织中加入预热的 2-ME/CTAB,混合使之充分湿润,于 65 ℃ 温育 10~60 min,期间不时混匀;4. 用等体积的 24:1 氯仿/异戊醇抽提匀浆
1);(5)NaCl 溶液(1 mol/L);(6)RNaseA;(7)TE液;(8)体积分数大于99.5%和等于76%乙醇. 1.3 实验方法 首先采用标准的水稻DNA抽提方法(CTAB法),但效果不理想.后通过查阅相关资料,我们采用改良的CTAB法,具体方法如下: (1)每份材料取叶7 g,加液氮后,用乳钵磨碎,于-20℃冰箱中冷冻10~15 h. (2)分别加入β-巯基乙醇210 μL,搅拌均匀. (3)加入1.5%的CTAB液20 mL,搅匀,在56℃条件下水浴20 min. (4)转入50
分析。 (8)保存制作干胶。 药品: 提取液:含10%TCA 和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮裂解液:2.7g 尿素0.2gCHAPS 溶于3ml 灭菌的去离子水中(终体积为5ml),使用前再加入1M 的DTT65μl/ml。 平衡缓冲液:1.5MTris-Cl ph8.8 6.7ml,尿素72.07g ,87%的甘油69ml,SDS 4g,溴酚蓝少许。溶涨液:尿素12g,CHAPS0.5g,溴酚蓝少许溶于无菌水中,总体积为25ml。使用之前再加入IPG缓冲液0.5vl/100vl,DTT1.5vl
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