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999
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联硕生物
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250G

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文献和实验三羟甲基氨基甲烷溶液40 ml使溶解,用1mol/L盐酸溶 液调节PH值至8.1,加水稀释至100 ml,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(PH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06 g,加盐酸赖氨酸3.65 g、氯化钠5.8 g乙二胺四醋酸二钠0.37 g,再加水溶解使成1000 ml,调节PH值至9.0,即得。 乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75 g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2 ml,再加水稀释至250 ml,即得。 巴比妥缓冲液(PH7.4) 取巴比妥钠4.42 g,加水使溶解并稀释
聚丙烯酰胺凝胶电泳法(PAGE)分离血清蛋白质(核黄素-TEMED聚合系统)(图)
-为慢离子,采用三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)作为缓冲配对离子。 电泳开始前,如图15-5A所示,慢离子位于两个电极槽中,快离子分布在三层凝胶中,样品在样品凝胶中,缓冲配对离子位于全部系统中。电泳进行中如图15-5B所示,快离子与慢离子的界面向下移动,由于选择适当的pH缓冲液,使蛋白质样品的有效迁移率(有效迁移率=mα,m为迁移率,α为解离度)介于快离子与慢离子的界面处,而浓缩成为极窄的区带。它们的有效迁移率按下列次序排列:mclαcl>mpαp>mGαG(Cl代表氯离子,P代表蛋白质,G
培养6小时;6000rpm、4℃离心10分钟收集菌株。将菌株重新悬浮于20ml含氨苄青霉素50g/ml的AP5培养基(每1000ml含葡萄糖15g,酪氨酸蛋白水解物11g,酵母提取物06g,硫酸镁0.19g,氯化铵1.07g,氯化钾3.73g,氯化钠1.2g,1M三乙醇胺120ml,pH7.4),30℃,250rpm,振荡培养20小时;6000rpm、4℃离心10分钟收集菌体,将菌体于-20℃冻存1hr以后,化冻,加1ml细菌周质腔蛋白提取液(三羟甲基氨基甲烷25mM,乙二胺四乙酸1mM,苯甲基
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