2-氯代三苯甲基氯,42074-68-0，26569-10G

RNA介导的基因沉默

的 ULTRAhyb-Oligo 缓冲液（17x 缓冲液）。使用前需在 68℃ 环境中进行溶解。 ( 7 ) 用 0.5 U T4 多核苷酸激酶（PNK，Roche) 和 6 μl  [γ-32P ]  ATP ( 5000 Ci/mmol ) 标记 1 μmol/L DNA 寡核苷酸（约含有 10 个与目的基因互补的 DNA 寡核苷酸）。 ( 8 ) 参照 Hamilton 和 Baulcombe 的方法，在 35°C 条件下进行 RNA 印迹杂交[14]。 3. 注释 注

实时荧光Taqman 探针设计的几个要点

影响不大，不相同的碱基最好不要在两端，因为两端不利于探针的杂交。且最好为A或T，而不能为G或A，因为A、T为双键，而G、A为三键。 2. 探针长度:Taqman探针的长度最好在25-32bp之间，且Tm值在68-72℃之间，最好为70℃，确保探针的Tm值要比引物的Tm值高出10℃，这样可保证探针在煺火时先于引物与目的片段结合。因此探针最好是富含GC的保守片段，保证其的Tm值较高。现在有Taqman MGB探针，在TAMER之后再标记一个MGB，可使探针的Tm值较高,即使探针片段较短

抑制B淋巴细胞瘤生长的嵌合抗CD20基因工程抗体

到pYZF载体，构成表达载体pYZcpp3。引物1： 5’- GTCTCCTCAGCCTCCACCAA-3引物2：5’-GCCGTCGCATGCTCACGGTGGGCACGGAGGACAGGGTGGGCATGT GTGAGTTTTGTC-3’6、抗CD20Fab和F（ab）2片段的表达及分离纯化挑取将载体pYZFcd20转化16C9菌株的单菌落接种5ml含氨苄青霉素50g/ml的2×YT培养基（每1000ml含蛋白胨16g，酵母提取物10g，氯化钠5g，pH7.4），37℃，200rpm，振荡