- ￥99 - 999
- Sigma
- 进口
- 255696-50G
- 2025年10月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT
- 保质期：
见标签
- 库存：
999
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
50G
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文献和实验达0.75饱和度（每升滤液加492g，5℃）。放置过夜，使胰蛋白酶原完全析出。次日抽滤，弃滤液，压紧并收集滤饼，即胰蛋白酶原粗品。2、 胰蛋白酶原的激活将胰蛋白酶原粗品称重（湿重），分次加入10倍体积预冷的 蒸馏 水（按滤饼重量计算），使滤饼完全溶解（一般情况滤饼中硫酸铵含量约占饼重1/4）。用5mol/L NaOH将溶液调至pH8.0，慢慢地搅拌下加入固体无水CaCl2使溶液的Ca2+终浓度达到0.1mol/L（要减去一部分氯化钙与硫酸铵结合生成硫酸钙的钙离子）。取出2mL
体积以预冷却的 PH2.5 - 3.0 乙酸酸化水溶液提取 (按 1 g 组织相当于 1 ml 体积计算，以此类推)。检查提取液中 PH，若高于 PH3.0 时应及时用 10% 乙酸调节，使提取液维持 PH2.5－3.0 之间。在冷室 5℃ 左右搅拌提取 18－24 h，而后用 4 层纱布过滤，尽量拧挤出滤液，滤液呈乳白色，用约 300 mlpH2.5 乙酸酸化水再提取残渣一次 (时间约为 1－2 h)，合并滤液，此时滤液 PH 值较高，可用 5M H2PO4 溶液调整 PH 至 2.5－3.0，放置
M199 + 35g NaHCO3 + 25mM Hepes + 5 mM glutamine + 50 ug/ml Gentamycin.1M Hepes: 119.1 g Hepes + 500 ml dH2 O.Media A: 1X HBSS (10X:50ml) + 10 mM Hepes (1M: 5 ml) + 5 mM EDTA (0.5M: 5ml) + 2.5 % FBS (12.5 ml) in 500 ml.Media B: RPMI1640 470 ml + Gent
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