- ￥99 - 999
- Sigma
- 进口
- 232777-50G
- 2025年10月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT
- 保质期：
见标签
- 库存：
999
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
50G
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文献和实验】1. 消化缓冲液：100 mM NaCl，10 mM Tris.Cl (pH8.0) 25 mM EDTA (pH8.0)，0.5% (w/v) SDS，0.1 mg/mL 蛋白酶 K。2. 7.5mol/L 乙酸铵。3. 100% 乙醇。4. 酚/氯仿/异戊醇。【实验方法与步骤】1. 将新鲜组织剪成小块并立即置于液氮中冻存；2. 将 200 mg～1 g 的组织用预冷的研钵研碎，或用锤子将其捣为细粉末，每 100 mg 组织用 1.2 mL 消化缓冲液悬浮，然后于 50℃ 摇荡温育 12~18 h
【样品】冻存的全血样本 【样品准备】 将冻存的血液样品充分融化后混匀。 【操作步骤】 1.活化硅胶膜 将吸附柱放入收集管中，加入250 ul Buffer BL，12,000 g离心1 min，活化硅胶膜。 2.样品消化 (1)取20 ul Proteinase K至1.5 ml离心管底部，然后加入200 ul充分混匀的全血样品，涡旋振荡10 s。 (2)加入200 ul Buffer gA1，旋涡振荡10 s，70℃孵育1 h，期间震荡1 ~ 2次。 3.孵育结束后加入200 ul无水乙醇
本方法由Dellaporta,Wood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的组织细胞用热的SDS裂解后，加入高浓度的KAc，0℃放置以除去蛋白和多糖类杂质，最后用乙醇或异丙醇沉淀。一 材料、试剂和仪器1 材料 新鲜的组织材料或-80℃冻存的材料2 试剂(1)提取缓冲液Tris-HCl 100mmol/L（pH8.0）EDTA 50mmol/L （pH8.0）NaCl 500 mmol/L灭菌后加β-巯基乙醇至10 mmol/L(2)裂解液20%SDS(3)高盐溶液5mol
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