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999
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联硕生物
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10G

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文献和实验pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶,121℃高压灭菌15min,冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1,分装于灭菌试管内,放成斜面备用。 试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果,尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。 16、氰化钾(KCN)培养基 成分: 蛋白胨 10g 氯化钠 5g 磷酸二氢钾 0.225g 磷酸氢二钠 5.64g 蒸馏水 1000ml 0.5%氰化钾溶液 20ml pH
温度是否比引物高8-10度。 f)定量数据的分析 分析定量数据主要有两种基本的方法 i)绝对定量 ii)相对定量 研究人员应该根据扩增子和试验目的来决定如何分析定量数据 h) 绝对定量 绝对定量是将未知样品与标准曲线相比较进行分析,一般标准品就是一个已知绝对浓度的 DNA样品,关于何种标准品用于标准曲线一直有很多讨论,理想的标准品其扩增方式应该是与待测样品一致得,然而这往往是不可能的。一些人会克隆他们得目的基因,并与未知样品比较。要注意得是,绝对定量分析的准确性是依靠标准品的准确
1、分别加入1/10体积3mol/l NaAc(pH4.5)和等体积5:1酸性酚氯仿溶液,冰浴20min 4℃,11000*g,20min离心。2、吸取上清至一50ml离心管,加入等体积异丙醇,混匀后-20℃放1小时。4、 4℃,1100*g,20min离心,弃上清。5、每管加入3毫升的溶液D,溶解沉淀,再用等体积的酚氯仿各抽提一次。6、加等体积的异丙醇,-20℃沉淀2小时。4℃,10000*g离心20min,弃上清。7、加入10ml冰预冷的75%乙醇,洗涤沉淀2次,晾干沉淀。8、溶解和比色
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