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文献和实验一种化学诱变剂,分子式为 NH2 OH,能使胞嘧啶( C)先变成羟氨基胞嘧啶,再经互变异构反应变成能与腺嘌呤配对的羟氨基胞嘧啶,导致 GC对变成了 AT对,从而诱发了基因突变。
亚硝酸细菌 nitrite bacteria 在硝化细菌中,有一群能在好氧条件下把氨氧化成亚硝酸的土壤细菌或海洋细菌。除在生物化学上进行研究的亚硝化单胞菌属外,已知的还有亚硝化球菌属、亚硝化螺菌属、亚硝化叶菌属等七属。据认为氧化的第一阶段是氦→羟胺,但尚未搞清酶学机制。第二阶段的氧化是羟胺→亚硝酸,其中间体是硝基羟胺。从热力学上来看,第二阶段也是强力的获得能量的反应。参与羟胺氧化的电子传递系统只存在于生长旺盛的内膜结构。其组成如下( cyt.为细胞
1. 临用之前制备羟胺溶液,置冰上待用。 2. 将用氯化铯纯化的 10 μ g 质粒 DNA 加到含 500 μ l 羟胺溶液的微型离心管。 3. 在 37 ℃下培养 20 小时。 4. 加入 10 μ l 的 5mol/L NaCl 、 50 μ g 1mg/ml 的牛血清蛋白( BSA )和 1ml 无水乙醇终止反应,置- 70 ℃沉淀 DNA10 分钟。 5. 离心 10 分钟,小心弃去所有上清液,收集 DNA 。
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