对甲苯磺酸甲酯,80-48-8，158992-100G

大鼠心室肌微血管内皮细胞的原代培养

。 选用80克SD大鼠（雌雄不限，购自复旦大学实验动物部），1%戊巴比妥钠（1ml/100g）腹腔注射麻醉，75%酒精浸泡5min消毒，将大鼠移至超净台进行操作，止血钳固定四肢，逐层打开胸腔，暴露心脏，剪开心包，由升主动脉处剪下心脏，放入D-Hanks平衡盐缓冲液中.冲净心腔中的血液，辨清心脏解剖结构，去除大血管、左右心房以及右心室和室间隔，保留左心室，小心去除心内膜及心外膜，用眼科剪剪碎余下的心室肌约2mm见方，滴加1ml进口胎牛血清.均匀接种于处理过的50ml培养瓶中，放入37℃、5%CO2

灵芝乳粉

　　三、操作要点 　　1．灵芝浸提液的制备：选成熟、干燥、红褐色的原木灵芝为原料，清净，沥干水分并粉碎成粗粒，过40目筛。加10倍重量净化水，在提取罐内通入蒸气加热至80-90℃、浸提1h后，增加蒸气压力加热至微沸，浸提温度在95―103℃，1h后用60目滤布过滤，得浸提液I；在滤渣中加入8倍重量净化水，于同样条件下进行第二次浸提，2h后，滤去残渣得浸提液Ⅱ。将两次滤液合并，加浸提液重量0.2％的β环状糊精(增加稠度并包埋苦味)，搅拌混匀后，送入真空浓缩装置进行真空浓缩，蒸发温度为55℃

原生质体分离与体细胞杂交

. 在倒置显微镜下观察，叶片细胞壁已降解，有圆球形原生质体释放到溶液中，即终止酶解。用吸管轻轻压挤叶片，以释放出全部原生质体； d. 通过一个60~80μm的细胞筛过滤以除去较大的碎屑。滤液置于1个螺帽 离心管 中，在100g下离心3min，使原生质体沉降； e. 弃取上清夜，将沉降物缓慢加入含有CPW配制的860mmol/L蔗糖溶液的螺帽 离心管 中，在在100g下离心10min； f. 将蔗糖溶液的顶部绿色原生质体带收集起来，并转入到另一个离心管中