- ￥99 - 999
- Sigma
- 进口
- 148202-10G
- 2025年10月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
RT
- 保质期：
见标签
- 库存：
999
- 供应商：
联硕生物
- 规格：
10G
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文献和实验本方法由Dellaporta,Wood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的组织细胞用热的SDS裂解后，加入高浓度的KAc，0℃放置以除去蛋白和多糖类杂质，最后用乙醇或异丙醇沉淀。一 材料、试剂和仪器1 材料 新鲜的组织材料或-80℃冻存的材料2 试剂(1)提取缓冲液Tris-HCl 100mmol/L（pH8.0）EDTA 50mmol/L （pH8.0）NaCl 500 mmol/L灭菌后加β-巯基乙醇至10 mmol/L(2)裂解液20%SDS(3)高盐溶液5mol
缓冲液中。Laemmli 缓冲液由 10% 甘油，0.2 mol/L Tris-HCl，pH 6.8，0.002% 溴酚蓝（Bio- Rad)，4% SDS， 5% β-巯基乙醇。 ( 3 ) 准备双向电泳：干燥的细胞核蛋白质组分在重悬缓冲液中再次溶解。重悬缓冲液含有 40 mmol/L Tris-HCl，2 mol/L 硫脲，7 mol/L 尿素，4% Triton X-100,100 mmol/L DTT，2% 载体两性电解质（Bio- Rad) ( pH 4~7 载体两性电解
。 用前100ml工作液加 b-巯基乙醇700ml。 4mol/L异硫氰酸胍变性缓冲液： 47.26g异硫氰酸胍加至100ml CSB缓冲液中。 配制：23.63g异硫氰酸胍加热65°C溶于20ml无RNase水中，加10 ml 5×CS，加350ml b-巯基乙醇，用无RNase的水定量至50ml。（约加25ml水） 2mol/L 乙酸钠NaAc（pH4.0）： 16.4g乙酸钠加至0.05％DEPC
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