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RT
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见标签
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999
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联硕生物
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500MG

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文献和实验pH8.0PBS、1%硫柳汞、离心机及离心管、烧杯(25ml)搅拌器、无菌吸管,无菌吸管及毛细滴管、烧杯(500ml)透析袋等。(2)方法及步骤①抗体准备 用o~4~C的pH8。0磷酸盐缓冲盐水将球蛋白溶液稀释至浓度为30~40mg/ml,置入25ml烧杯内,放于冰槽中。②荧光色素准备 按每毫克免疫球蛋白加入荧光素0.01rug计算,称取所需的荧光素,用3%碳酸钠水溶液溶解。③将准备的抗体与荧光色素溶液等量混合,充分搅匀,在o~4~C冰箱中结合(最好在磁力搅拌机上持续搅拌)18~24h。④透析
1M/500 ml] 0.01 % Na-desoxycholate [50 mg/500 ml] 0.02 % NP-40 [100 microl/500 ml] 1xPBS [50 ml 10x/500 ml] Comments Fixation time is critical. Overfixation inhibits enzyme activity. Close control of reaction temperature (30OC) and pH
,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
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