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文献和实验相关专题 蛋白质鉴定 一、原理:蛋白质含有两个以上的肽键,因此有双缩脲反应。双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离子结合,生成紫红色络合物的反应。其颜色的深浅与蛋白质的含量成正比,而与蛋白质的相对分子 质量 和氨基酸的组成无关。 二、材料与试剂 双缩脲试剂:称取1.50g五水硫酸铜和6.0g酒石酸钾钠(四水),用500ml左右的蒸馏水溶解,在搅拌下加入300ml10%氢氧化钠溶液,定容至1L,储存于塑料瓶中。可长期
相关专题 一、原理有机含氮化合物与浓硫酸共热消化,氮转化为氨,再与硫酸结合成硫酸铵。硫酸铵与强碱反应,放出氨。将氨蒸馏到过量的标准无机溶液中,再用标准碱溶液进行滴定。根据测得的氨量,计算样品的总氮量。 二、试剂与材料 浓硫酸、硫酸钾-硫酸铜粉末(称取80g硫酸钾和20g硫酸铜(五水),0.3g二氧化硒研细混合)、30%氢氧化钠溶液、2%硼酸溶液、0.01M标准盐酸、混合指示剂(田氏指示剂)储存液(取50ml0.1%甲烯蓝乙醇
)100ml,加入试剂B(2%酒石酸钾钠溶液与1%五水硫酸铜等体积混合)2ml混合而成。 福林酚试剂乙:吸取5ml苯酚试剂加入5ml蒸馏水稀释而成。 分光光度计、恒温水浴槽、蛋白质样品 三、操作方法 1、标准曲线的制作:分别吸取0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml标准溶液于小试管中,分别加进不同量的蒸馏水,补足到1ml。各加入5ml试剂甲,混匀后于室温下(25℃左右)放置10min。再加入0.5ml试剂乙,立即混匀,于室温下反应30min
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