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联硕生物
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5ML

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文献和实验电泳(PAGE ) 设备。 ( 20 ) HPLC、HPLC-电喷电离(ESI ) 和质谱设备。 ( 21 ) 微板阅读器。 4. 注 1. 光学纯(对应体纯)的非天然氨基酸可能不易购得。如果是消旋混合物,应使用 20 μg/ml L-对应体。如果非天然氨基酸是消旋混合物且要与天然氨基酸混合的话,应加倍非天然氨基酸的用量。例如,95% 4fW 需要 38 μg/ml DL-4fW 加 1 μg/ml L-W。 2. 为了掺入非天然氨基酸,优先使用营养缺陷型菌株,但并不
与免疫组化PAP法的联合程序 (1)切片入PBS冲洗5min,最好是将切片漂洗于灭菌器皿中。 (2)0.1mol/L 甘氨酸PBs 5min。 (3)0.4%Triton X-100 PBS 15min。 (4)1μg/ml蛋白酶K,37℃保温30min。 (5)4%多聚甲醛PBS固定5min 。 (6)PBS冲洗2×3min。 (7)0.25%乙酸酐(0.1mol/L 三乙醇胺配)10min。 (8)2×SSC冲洗10
Invitrogen的王牌:Lipofectamine 2000转染试剂
铺板。在加入复合物前移去生长培养基,替换为0.5ml无血清培养基。 在37℃,5%的CO2中保温24-48小时,无须去掉复合物或更换培养基或者在4-5小时后更换生长培养基也不会降低转染活性。 在细胞中加入复合物24-72小时后,分析细胞抽提物或进行原位细胞染色,检测报告基因活性。这依赖于细胞类型和启动子活性。对稳定表达,在开始转染一天后将细胞传代至新鲜培养基中,两天后加入筛选抗生素。进行稳定表达需要数天或数周。 对于96孔板培养,不再需要提前一天进行细胞铺板,而可以直接
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