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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥860.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1260.0 |
英文名称:MHC Class-I chain related gene A
简称:MICA
单位:pg/mL
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月。
实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(MICA)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的组织相容性复合体Ⅰ类相关基因A(MICA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成:30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样,待测样品孔中先加样品稀释液 ,然后再加待测样品(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。
10.终止:每孔加终止液,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照产品手册操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验由第15号染色体上的基因编码。 第Ⅱ类基因: 为细胞表面第Ⅱ类抗原糖蛋白肽链编码的基因。在小鼠H-2复合体中第Ⅱ类基因在H2-K座位和H2-D座位之间的Ⅰ区。小鼠的Ⅰ区有一系列控制免疫调节的基因。第Ⅱ类基因称为Ⅰ区相关基因或免疫相关基因,简称Ia基因,它的产物是Ia抗原。人的第Ⅱ类基因不在HLA-A座位和HLA-B座位之间,而在HLA-B座位着丝粒一侧的D/DR区。人的Ia样抗原也由特异性抗血清检出,称为DR抗原,受HLA-DR座位控制。
区与D区基因可编码H-2抗原系,I区基因编码的分子称为I区相关抗原或Ia抗原系(Ia),S区基因可编码血清因子和补体成分,G区基因与血型抗原有关。1981年J.克莱因将MHC基因座按功能分为四类(图1)。Ⅰ类座包括K、D和L座,其编码的分子称为Ⅰ类分子(即K、D和L分子);Ⅱ类座,其编码的分子称为Ⅱ类分子(Ia分子);Ⅲ类座,其编码的分子称为Ⅲ类分子(血清因子和补体分子);Ⅳ类座,位于D座右侧,是否属于H-2复合体尚未确定,但与H-2连锁,它包括TLa座和Qa座,其编码的分子称为Ⅳ类分子(TL
细胞产生的外泌体也备受研究人员的关注。免疫细胞炎症是一种保护身体免受感染或损伤的免疫反应,然而,不受控制的炎症可能导致多种疾病。炎症的基本介质是先天免疫分子,如细胞因子、趋化因子和先天免疫细胞等。外泌体作为一种治疗免疫系统过度活跃的创新疗法越来越受到欢迎。树突状细胞(dendritic cell,DC)和巨噬细胞产生的外泌体已被证明具有抗免疫吞噬作用,DC 产生的外泌体可通过肽-主要组织相容性复合体(major histocompatibility complex,MHC) 激活CD4+ 或CD8+ T
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