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- 国产
- 2025年10月16日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
100
- 灵敏度：
详询
- 样本：
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物：
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种：
人
- 应用：
科研
- 检测方法：
夹心法
- 检测范围：
详见产品手册
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥1300.0 |
英文名称：recombination activating gene 2
简称：RAG-2
单位：pg/mL
准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。
特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
有效期：6个月。
实验原理：
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被重组激活基因2（RAG-2）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的重组激活基因2（RAG-2）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
试剂盒组成：30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。
样品收集、处理及保存方法：
1. 血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品：
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作步骤：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样，待测样品孔中先加样品稀释液 ，然后再加待测样品（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂A，再加入显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟。
10.终止：每孔加终止液，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作注意事项：
1. 试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照产品手册操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验B 细胞内抗体产生新机制！两篇 Nature 重磅揭示染色质环挤压导致 V(D)J 重组和抗体类别转换重组
）的三种基因片段将 DNA 重新排列起来，以组装编码抗体的基因。这些基因片段的两侧是进化上较为保守的称为重组信号序列（recombination signal sequence， RSSs）的 DNA 序列，V（D）J 重组发生在 RSS 和编码序列之间，由重组酶催化。重组激活基因（recombination-activating gene， RAG）RNG1 和 RNG2 编码的蛋白质是一种核酸内切酶，通过将 D 片段连接到 J 片段来启动 B 细胞前体的 Igh V (D) J 组装，然后再将上游
酶的参与。顾名思义，重组酶是一组参与V、D、J基因片段重组的酶，包括RAG蛋白、末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)以及参与修复DNA双链断端的多种酶(如内切酶、外切酶、DNA合成酶等)。重组激活基因(RAG)编码的蛋白称为RAG―l和RAG―2。由RAC―1和RAG-2形成的复合物是一种内切酶，只表达在T、B细胞不成熟阶段。Schatz等以包含RSS序列的J。Vx基因转染各种细胞，发现只有在前B细胞和前T细胞中才能发生J。和Vx的重排，而在成熟的T、B细胞中则无重排发生，表明重组酶活性仅限于T、B细胞成熟
完备。显然，没有淋巴结就难以大量形成生发中心，没有生发中心也就没有Ig的亲和力成熟和类别转换，因而也就谈不上不同类别抗体的形成。重组激活基因(只AG)插入有颌类脊椎动物基因组之后出现适应性免疫。 从固有免疫向适应性免疫进化的一些关键性事件，不是发生在无脊椎动物和脊椎动物之间，而是出现在脊椎动物的无颌类(如圆口类的八日鳗)和有颌类(如软骨鱼类的鲨鱼)之间，时间大约在四亿五千万年前。期间发生了两件事，一是出现基因组的两次大范围重复；二是携带有重组激活基因(RAG)的转座子(transposon
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