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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
100
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥850.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1250.0 |
英文名称:Hemoglobin F
简称:Hb-F
单位:μg/mL
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月。
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中血红蛋白F含量。
实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被血红蛋白F(Hb-F)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血红蛋白F(Hb-F)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成:30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样,待测样品孔中先加样品稀释液 ,然后再加待测样品(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。
10.终止:每孔加终止液,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照产品手册操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验显性遗传现象是我国遗传学家谈家桢于1946年发现的。 显隐性关系的另一种例外是共显性。这是指一对等位基因的两个成员在杂合个体中都呈显性,都显现出来。前面提到的正常血红蛋白基因Hb a )和镰形细胞贫血症的血红蛋白基因(Hb s ),在Hb A Hb s 的杂合个体中表现为共显性,分别产生了正常血红蛋白分子和镰形细胞贫血症血红蛋白分子。只不过其宏观性状是正常个体,好似存在显隐性关系。共显性最好的例子就是红细胞血型。红细胞膜上的抗原统称为不同的血型
红细胞中运输氧及二氧化碳的蛋白质,由球蛋白与血红素结合而成。分子量约 64, 500,其中蛋白质占 96%。血红素由二价铁原卟啉组成。球蛋白由两对不同肽链组成。每个肽链含 1个血红素分子,所以 1个血红蛋白分子能结合 4个氧分子。正常人血红蛋白( Hb)含血红蛋白 A( HbA)、血红蛋白 A2 ( HbA2 )及血红蛋白 F( HbF)。 HbA由一对α链及一对β链构成(α 2 β 2 ),约占成人血红蛋白的 97%。 HbA2 由α链及δ链组成(α 2 δ
血红蛋白分子结构及成分是临床检验技师考试的部分内容,医学教育网搜集整理相关内容供大家参考。 血红蛋白分子是有核红细胞、网织红细胞内形成的一种含色素蛋白质。色素部分为亚铁血红素,蛋白质部分为珠蛋白。亚铁血红素由原卟啉、铁组成,受δ氨基-γ酮戊酸合成酶、血红素和Fe2+的调节。Fe2+位于卟啉环中心,有6个配位键,4个配位键与原卟啉分子的4个氮原子相连,第5个配位键与珠蛋白肽链F肽段咪唑基相连,第6配位键为空位,能可逆地与氧结合,完成运氧功能。 蛋白肽链分为α、β
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