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USEN BLOCK超敏非蛋白封闭液

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  • EIA01L003
  • 中国北京
  • 2026年01月09日
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      99

    • 英文名

      USEN BLOCK(Ultra Sensitive Block)

    • 保质期

      12个月

    • 供应商

      北京新艾进生物科技有限公司

    • 保存条件

      4-30°C

    • 规格

      100ml

    产品规格:100ml  200ml  500ml  1000ml

    核心成分:低分子偶极水合物

    用途:用于封闭ELISA WB ICA等免疫检测的固相载体,提高灵敏度

    技术特点:

    (1)创新低分子偶极水合物封闭机制,背景更低

    (2)辅助抗原抗体形成氢键,增强阳性响应值

    (3)不含蛋白质成分,减少或消除传统蛋白封闭试剂的交叉反应、糖基化干扰、生物素干扰等问题

    优势:辅助提高免疫分析灵敏度

     

    验证数据:

    1、糖基化VEGF蛋白包被板子,检测人血清中抗VEGF单抗,detection为羊抗人-HRP

    简要:抗VEGF单抗的PK临床生物分析,包被糖基化的VEGF抗原蛋白,detection为羊抗人IgG-HRP,由于人血清中正常IgG的干扰,容易出现较高的背景信号,用USEN BLOCKUltra-Sensitive Block)封闭包被板,显著降低背景信号,提高灵敏度。

    Indicator(A value)

    1%BSA Block

    Superblock

    USEN BLOCK

    Blank

    0.142  0.139

    0.098  0.102

    0.019  0.018

    Individual1

    0.097  0.102

    0.095 0.098

    0.014  0.015

    Individual2

    0.112  0.115

    0.068  0.074

    0.017  0.016

    Individual3

    0.140  0.145

    0.134  0.132

    0.019  0.018

    2ng/ml

    S/blank

    0.570  0.566

    4.27

    0.420  0.438

    4.29

    0.685  0.691

    37.1

    检出限

    410pg

    300pg

    30pg

    小结:所有操作步骤一致的情况下USEN BLOCK的信噪比和检出限显著优于1%BSA Block Superblock

     

    2、AAV包被,检测人血清中抗AAVdetectionPG-HRP+TMB指示信号

    简要:在AAV类疫苗临床免疫原性分析中,用桥接法检测抗AAV时,因AAV巨大分子量引起的空间位阻效应,强烈抑制双AAV抗原和ADA的桥接,使得分析方法的灵敏度难以满足法规要求的100ng/ml。为了开发灵敏度和选择性符合法规要求的AAV抗药抗体检测方法,研究者采用包被AAV,用蛋白G-HRPdetction的模式,但由于AAV衣壳蛋白结构的复杂性及蛋白G和抗体结合的广谱性,使得正常血清的背景信号异常高,掩盖了抗AAV的正常信号值,依然无法达到100ng/ml的灵敏度。本方法用USEN BLOCKUltra-Sensitive Block)很好的解决了这一难题。

    indicator

    Startingblock

    USEN BLOCK

    A value

    S/N

    A value

    S/N

    blank

    0.480 0.420

    -

    0.035 0.038

    -

    Cal.1 50ng/ml

    0.439 0.456

    0.99

    0.125 0.128

    3.46

    Cal.2 100ng/ml

    0.477 0.420

    0.99

    0.181 0.192

    5.10

    Cal.3 2000ng/ml

    0.798 0.764

    1.73

    0.982 0.990

    27.01

    小结:用蛋白G法检测人血清样本中抗AAV时,USEN BLOCK背景信号是Startingblock的十二分之一,血清本底A值低于0.040,灵敏度达到50ng/ml,效果优于Startingblock

     

    3、her2单抗的中和抗体分析,detection为人源抗her2单抗-HRP,包被her2靶点蛋白,TMB指示信号,负判读法检测中和抗体。

    Indicator

    1%BSA Block

    USEN BLOCK

    A value

    S/N

    A value

    S/N

    Blank

    1.209 1.208

    -

    1.847

    1.875

    -

    Cal.1 100ng/ml

    1.236 1.229

    1.02

    1.645 1.658

    0.88

    Cal.2 200ng/ml

    1.221 1.238

    1.01

    1.486

    1.465

    0.79

    Cal.3 400ng/ml

    1.197 1.172

    0.98

    1.259 1.237

    0.67

    Cal.4 2000ng/ml

    0.956 0.968

    0.79

    0.538 0.495

    0.27

    小结:对于负判读法中和抗体的检测,和1%BSA封闭液相比,由于USEN BLOCK系统噪声极低,阴阳信号反差明显,使得配体法检测中和抗体的方法开法难度显著降低,分析灵敏度有较大提高。

     

    4、封闭时间及温度对比

    简要:包被糖基化的PD1抗原蛋白,检测人血清中抗PD1单抗,detection为羊抗人IgG-HRP,考查不同封闭时间和不同封闭温度下USEN BLOCK的功能效果, 1%BSA封闭液作对照。

    indicator

    37℃封闭15分钟

    28℃封闭30分钟

    8℃封闭60分钟

    BlankA值)

    1%BSA0.125   

    USEN BLOCK:0.029

     

    1%BSA:0.131   

    USEN BLOCK:0.020

     

    1%BSA:0.146   

    USEN BLOCK:0.016

     

    2ng/mlA值)

    1%BSA:0.213   

    USEN BLOCK:0.312

     

    1%BSA:0.215   

    USEN BLOCK:0.298

     

    1%BSA:0.209   

    USEN BLOCK:0.276

     

    小结:USEN BLOCK 37℃封闭15分钟,即可达到良好效果,封闭温度较低时,对背景信号值抑制效果更优,阳性响应值也稍低,但信噪比仍然显著优于1%BSA封闭液。

     

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    • 作者
    • 内容
    • 询问日期
    图标文献和实验
    相关实验
    • 免疫组化常见十大问题与解析

      图 1 实验流程与常见问题索引 Q1:染色结果呈阴性,是怎么回事? (1)抗体来源选择错误:本试剂盒二抗为抗兔/鼠,请确保一抗来源的种属为兔源或鼠源。 (2)组织切片本身不存在目的蛋白:可通过 The Human Protein Atlas 数据库或 UniProt数据库查询目的蛋白在细胞或组织中的表达情况。 (3)抗体浓度和质量问题:提高抗体工作浓度或延长孵育时间;确认抗体可进行IHC实验,通过IHC实验排除抗体质量问题。 (4)脱蜡不完全:可根据切片上是否存在透明颗粒,判断是否存在脱蜡

    • 第三篇 免疫病理-- 超敏反应--Ⅰ型超敏反应

      、臭虫等通过其唾液管将吃得开排入人体内而引起荨麻疹、红斑等局部皮肤过敏性反应。   3.抗原的性质以相同途径进入人体的抗原,有的引起强速发型超敏反应,有的则不能,虽其确切原因尚不明,但与抗原本身的特性,特别是被T细胞识别的表位的特性有关。有些药物如青霉素,能引起强烈IgE抗体应答。这些药物与蛋白质结合,形成半抗原(药物)- 载体 (蛋白质)结合物,而成为新抗原(neoantigens)。 有些蛋白质抗原与有利于IgE抗体合成的具有佐剂作用

    • Western Blot常见问题总结

      质量不好,会最终导致显影要么漆黑一片,要么啥都没。我们现在用的BD的,很好很稳定,可回收利用。 NC膜,PVDF膜我们都用过, PVDF膜的好处是蛋白载量大,韧性好。唯一的麻烦是事先得用甲醇泡几分钟,目的是为了增强膜的正电荷。甲醇泡完后,得在转移缓冲里泡一两分钟。4 .关于显色液 我们选用进口超敏ECL显色液。用普通的显色液检测内参一般都没问题,但对于表达量比较低的蛋白就不容易显色出来,而超敏的就不一样,即使蛋白表达量很低,也可以检测出来。5. Western Blot实验关键 Western

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