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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
200
- 灵敏度:
详询
- 样本:
血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本
- 标记物:
hrp辣根过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
科研
- 检测方法:
夹心法
- 检测范围:
详见产品手册
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥900.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥1300.0 |
英文名称:Thyroid stimulating antibody
简称:TSAb
单位:ng/mL
准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6个月。
使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中甲状腺刺激素抗体;甲状腺刺激免疫球蛋白含量。
实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被甲状腺刺激素抗体;甲状腺刺激免疫球蛋白(TSAb)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的甲状腺刺激素抗体;甲状腺刺激免疫球蛋白(TSAb)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒组成:30 倍浓缩洗涤液、酶标试剂、酶标包被板、样品稀释液、显色剂A 液、显色剂 B 液、终止液、标准品、标准品稀释液、产品手册、封板膜、密封袋。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样,待测样品孔中先加样品稀释液 ,然后再加待测样品(样品最终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂,空白孔除外。
7.温育:操作同 3。
8.洗涤:操作同 5。
9.显色:每孔先加入显色剂A,再加入显色剂B,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15 分钟。
10.终止:每孔加终止液,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。
操作注意事项:
1. 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2. 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3. 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照产品手册操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4. 严格按照产品手册中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5. 所有液体组分使用前充分摇匀。
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文献和实验功能亢进的鉴别诊断也有较大价值。正常人血清中很少检出甲状腺抗体,或仅有5%~10%无疾病症状人群有低度反应;女性和年龄较大的人群检出率较高。检出该抗体可提示既往患过自身病,也可能是自身免疫病的早期指标。 在甲状腺功能亢进(Graves病)患者的血清中存在甲状腺刺激抗体(TSAb),包括长效甲状腺刺激素(LATS)和LATS者(LATS-P)。这些抗体作用于甲状腺细胞表面的TSH受体,使受体活化并促进甲状腺素的释放;过多的甲状腺素引起机体的代谢亢进。 (二)抗乙酰胆碱受体抗体 抗乙酰
甲状腺机能亢进的疾病,其主要特征为:多食、消瘦、基础代谢率高(常在 40~ 100%)、易激动、多汗、心悸、尿氮增加、甲状腺肿大,大部分患者有眼球突出的症状,故名。引起甲状腺病态分泌过量的因子,是一种 G类免疫球蛋白,它是由淋巴细胞产生的针对甲状腺抗原的自身抗体,它促进甲状腺摄取和浓缩碘、促进合成与释放 T4、 T3,其作用出现较慢但更持久,称长效甲状腺刺激素( LATS),还有第二种 G类免疫球蛋白,具有防止甲状腺蛋白质破坏 LATS的作用,称为 LATS的保护
等等)。对于前者,大家都比较熟悉;对于后者,大家往往了解不多。临床上经常有人询问:抗体水平升高或降低有什么意义?治疗目标是纠正甲功异常还是让抗体转阴?临床有那些办法可以降低抗体水平?下面我们就来谈谈这方面的问题。 2、甲状腺自身抗体的种类及意义 甲状腺抗体是指由于自身免疫紊乱产生的针对甲状腺某些成分的免疫球蛋白。临床主要分为两大类: (1)针对甲状腺细胞表面TSH受体的抗体 即TSH受体抗体(TRAb),它是一类具有异质性的特异性免疫球蛋白,有甲状腺刺激抗体(TSAb)和抑制抗体(TBAb)2种亚型
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