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- 2026年03月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
159
- 英文名：
Monkey pox Virus Detection Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
英文名称：Monkey pox Virus Detection Kit
猴-痘（Monkeypox）是由猴-痘病毒（Monkeypoxvirus）一种病毒性人畜共患病（一种从动物传播给人类的病 毒），病毒最早在猴子身上发现。发生于非洲中西部雨林中的猴类，也可感染其他动物，偶可使人类受感染。临床表现类似天-花，但病情较轻。这种疾病由猴-痘病毒造成，它属于一个包括天-花病毒，并在天-花疫苗中采用的病毒和牛痘病毒的病毒组，但需与天-花、水痘相鉴别。这种病毒可以通过直接密切接触由动物传染给人，也可以在人与人之间传播。 本试剂盒适用于检测皮疹、痂皮、水疱液、脓疱液和全血等样本中的猴-痘病毒，用于猴-痘病毒感染的辅助 诊断。
本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对猴-痘病毒特异性引物，结合一条特异性探针， 用荧光 PCR 技术对猴-痘病毒的 DNA 进行体外扩增检测，用于对可疑感染者的病原学检测。
猴-痘病毒（MPV）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）试剂组成：
| 包装规格 | 50T/盒 |
| MPV 反应液 | 500μL×2 管 |
| 酶液 | 50μL×1 管 |
| MPV 阳性质控品 | 250μL ×1 管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1 管 |
储存条件及有效期：-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
适用仪器：ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
标本采集：皮疹、痂皮采集：取皮疹上盖或痂皮，装入 2mL 的灭菌塑料管里，密封，4℃或 4℃以下保存运输。 水疱液、脓疱液采集：用附有注射针的一次性注射器吸取 0.2mL 的 PBS，从疱膜插入，来回 2 次~3 次混匀后吸取内容液，把吸取的内容液装入血清管，4℃或 4℃以下保存运输。 全血采集：脉采集疑似病人抗凝全血 5mL，4℃或 4℃以下保存运输。
保存和运输：采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。
使用方法：
1. 样品处理（样本处理区） 1.1 样本前处理 皮疹、痂皮等病变组织：取 1mg~100mg 的病变组织移入冰浴预冷的研钵中，快速用力研成匀浆(富含胶原蛋白的皮肤等组织需加液氮研磨至粉末状)；水疱液、脓疱液及全血样品直接取 500μL 于 1.5mL 灭菌离心管中。 1.2 核酸提取 推荐采用公司生产的核酸提取试剂（离心柱法）进行核酸提取，请按照试剂说明书进 行操作。 2. 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；样品每满 10 份，多配制 1 份)，每测试反应体系配制如下表： 试剂 MPV 反应液 酶液 用量（样本数为 N） 19μL 1μL 将混合好的 MPV 反应液分装到 PCR 反应管中，20μL/管。 3. 加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀， 短暂离心。 4. PCR 扩增（核酸扩增区） 4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内； 4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL； 荧光通道选择： 检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。 4.3 推荐循环参数设置： 步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号 1 1 cycle 95℃ 2min 否 2 45 cycles 95℃ 15sec 否 60℃ 30sec 是 5. 结果分析判定 5.1 结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析 ABI7500 仪器为例） 反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用户可根据实际情况自行调整，Start 值可设在 3～15、End 值可设在 5～20，使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击 Analyze 自动获得分析结果。 5.2 结果判断 阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线； 阴性：样本检测结果无 Ct 值，且无特异性扩增曲线； 可疑：样本检测结果 40＜Ct 值≤45，建议重复检测，如果检测通道仍为 40
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验小鼠的一些常见疾病可引起小鼠发病甚至死亡，使实验中断，造成人力、物力和时间的极大浪费。有些病源呈隐性感染，可使实验结果受到极大干扰，以致导致错误的结论。有些疾病为人畜共患病，则更加具有危险性。小鼠的一些常见疾病有以下几种。一、鼠痘（Mouse Pox）由鼠痘病毒（poxvirus of mice,MPV）引起，多呈爆发性流行，致死率较高，常造成小鼠全群淘汰，危害极大。临床表现以四肢、尾和头部肿胀、溃烂、坏死甚至脚趾脱落为特征，故又称脱脚病病毒(ectromelis virus)。1. 分布
，弃上清。 （8）用75%的酒精洗涤2次，每次均于4℃，10000rpm离心5min，弃上清。 （9）真空抽干，并用适量1×TE溶解沉淀。如此即得所需 DNA 片段。 三、地高辛配基随机标记 DNA 探针法 （一）概述 基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础，在核酸水平检测人类遗传性疾病的基因缺陷和一些传染病病原体的方法。其基本过程是：制备 DNA 探针，标记探针，检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射
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