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- Cytiva (GE Life)
- 17526802
- 2025年09月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
EA
镍-琼脂糖凝胶 HP（高分辨率）100 mL
一、产品定位
二、核心优势
| 维度 | 性能 |
|---|---|
| 高结合载量 | ≥40 mg His 标签蛋白/mL 填料，回收率行业领先 |
| 高分辨率 | 34 μm 均一粒径，峰形尖锐，轻松区分结构类似物 |
| 宽pH耐受 | 操作 pH 3–12，CIP 清洗 pH 2–14，可在线碱洗 |
| 化学稳健 | 耐受 1 M NaOH（40 °C/1 周）、70 % 乙酸、2 % SDS、30 % 异丙醇，寿命更长 |
| 低镍脱落 | 预装 Ni²⁺ 稳定螯合，金属离子载量≈15 μmol/mL，兼容 EDTA 低至 1 mM 的缓冲体系 |
| 兼容性强 | 允许还原剂（DTT、TCEP）、变性剂（8 M 尿素、6 M 盐酸胍）、非离子/离子型去污剂 |
三、典型应用
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实验室规模精纯：His 标签酶、疫苗抗原、膜蛋白胞外域
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中间精制步骤：融合蛋白聚集体与单体分离
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串联层析：与离子交换（Q Sepharose FF）或分子筛联用，一步得高纯度活性蛋白
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结构生物学：制备晶体/冷冻电镜级样品，去除杂标签与降解片段
四、操作参数速览
| 参数 | 建议范围 |
|---|---|
| 平衡/结合缓冲液 | 20 mM 磷酸钠，0.5 M NaCl，pH 7.4（可含 10–20 mM 咪唑） |
| 洗脱缓冲液 | 20 mM 磷酸钠，0.5 M NaCl，500 mM 咪唑，pH 7.4 |
| 流速（XK16/20 柱） | 150 cm/h 以内保持高分辨率 |
| 在线清洗（CIP） | 0.1–0.5 M NaOH 或 50 mM EDTA（pH 8.0）去除沉淀或剥离 Ni²⁺ |
| 再挂 Ni²⁺ | 0.1 M NiSO₄ 冲洗 → 5 CV 水 → 再平衡，即可恢复载量 |
五、储存与稳定性
在未开封且按规定储存条件下，有效期 5 年。
六、注意事项
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避免含 EDTA/EGTA/柠檬酸 >1 mM，防止 Ni²⁺ 脱落
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首次使用建议先做梯度洗脱，优化咪唑浓度
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层析系统温度 ≥20 °C 可获得更佳分辨率
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若样品含高浓度还原剂（>10 mM DTT），建议换用 TCEP 或选择 Co/Talon 填料
| 产品货号 | 品牌 | 产品名称 | 规格 | 大包装及货期 |
| 17526802 | Cytiva (GE Life) | NI SEPHAROSE HP 100 ML | EA | 立即咨询 |
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文献和实验大家提供以下标签蛋白纯化的填料和多种规格的预装柱。 His 标签蛋白填料简介 His 标签蛋白填料的选择 1 科研微量分析和制备 Cytiva 经典 Ni 填料 Ni Sepharose 6 Fast Flow（FF）和Ni Sepharose High Performance（HP）适用于实验室级别目标蛋白的分析和制备。如需快速进行目标蛋白的捕获，可选择 Ni Sepharose 6 Fast Flow（FF）填料，它可帮助您节省一半的时间以提高课题研究的进度。如对蛋白
6xHis-tagged protein purification using Qiagen Ni-NTA Column
Buffers:Lysis Buffer (1 liter)50 mM NaH2PO4 6.90g NaH2PO4.H2O (MW 137.99g/mol )300 mM NaCl(up to 2M)17.54gNaCl(MW 58.44)or 60ml 5M10 mM Imidazole (up to 100mM)0.68g (MW 68.08 )10 mM BME (up to 20 mM)0.69 ml stock (14.4M )Adust pH to 8.0 using
6xHis-tagged protein purification using Qiagen Ni-NTA Column under Native Condit
Buffers:Lysis Buffer (1 liter)50 mM NaH2PO4 6.90g NaH2PO4.H2O (MW 137.99g/mol )300 mM NaCl(up to 2M)17.54gNaCl(MW 58.44)or 60ml 5M10 mM Imidazole (up to 100mM)0.68g (MW 68.08 )10 mM BME (up to 20 mM)0.69 ml stock (14.4M )Adust pH to 8.0 using
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