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- 2026年02月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
111
- 英文名：
Torque teno sus virus 2 Detection Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
50T
英文名称：Torque teno sus virus 2 Detection Kit
猪细环病毒（Torque Teno Sus，TTSuVs）是一种小型、无囊膜、单股闭合环状 DNA 病毒，具有高度的遗传多样性。根据核苷酸序列差异，TTSuV 可分为 TTSuV1 和 TTSuV2 两种基因型。TTSuV1 属于 Iotatorquevirus 病毒属，其有 TTSuV1a 和 TTSuV1b 两个不同的基因型，而 TTSuV2 属于 Kappatorquevirus 病毒属，有 TSuVk2a 和 TTSuVk2b 两个不同的基因型。TTSuV 可以感染健康或患病的猪群。TTSuV 与圆环病毒 2 型（PCV2）共感染， 可引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS），与猪呼吸与繁殖综合征病毒（PRRSV）混合感染引起皮炎肾病综合征（PDNS），致病机理尚不明确。 本试剂盒适用于检测淋巴结、脾、肺和血清等标本中猪细环病毒 2 型 DNA，适用于猪细环病毒 2 型感染的辅助诊断。
本试剂盒用猪细环病毒 2 型特异性引物，结合特异性荧光探针，用荧光 PCR 技术对猪细环病毒 2 型的 DNA 进行体外扩增检测，用于对可疑感染病料的病原学检测。
猪细环病毒 2 型（TTSuV2）核酸检测试剂盒（探针法荧光PCR）试剂组成：
| 包装规格 | 25T/盒 | 50T/盒 |
| TTSuV2 反应液 | 500μL×1 管 | 500μL×2 管 |
| 酶液 | 25μL×1 管 | 50μL×1 管 |
| TTSuV2 阳性质控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
| 阴性质控品 | 250μL ×1 管 | 250μL ×1 管 |
储存条件及有效期：-20℃±5℃，避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次，有效期 12 个月。
适用仪器：ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。
标本采集：病死或扑杀猪，取淋巴结、脾、肺等组织；待检活猪，取血 5mL； 组织样品：取淋巴结、脾和肺等组织，置于无菌离心管内备用。 血清样品采集：用无菌注射器抽取受检猪静脉血 5mL，置于无菌离心管内，2000r/min~3000r/min 离心 10min， 吸取上清液到新的离心管内备用。
保存和运输：采集或处理好的样品在 2℃~8℃条件下保存应不超过 24 h；若需长期保存，应放置-70℃以下保存，冻融不超过 3 次。
使用方法：
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 样品前处理 血清样品：无需进行前处理，直接用于核酸提取； 组织样品：取 1g 组织，剪碎，加人 2mL 生理盐水进行研磨，制备组织匀浆，8000r/min 离心 5min，取上清用于后续的核酸提取。
1.2 核酸提取 推荐采用公司生产的核酸提取或纯化试剂（磁珠法或离心柱法）进行核酸提取，请 按照试剂说明书进行操作。
2. 试剂配制（试剂准备区） 根据待检测样本总数，设所需要的 PCR 反应管管数为 N（N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照；反应管数每满 10 份，多配制 1 份），每测试反应体系配制如下表： 试剂 TTSuV2 反应液 酶液 用量 19μL 1μL 将混合好的测试反应液分装到 PCR 反应管中，20μL/管。
3. 加样（样本处理区） 将步骤 1 提取的核酸、阳性质控品、阴性质控品各取 5μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短 暂离心。
4. PCR 扩增（核酸扩增区） 4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内； 4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为 25μL；荧光通道选择：检测通道（Reporter Dye）FAM， 淬灭通道（Quencher Dye）NONE，ABI 系列仪器请勿选择 ROX 参比荧光，选择 None 即可。 4.3 推荐循环参数设置： 步骤 循环数 温度 时间 收集荧光信号 1 1 cycle 95℃ 2min 否 2 45 cycles 95℃ 15sec 否 60℃ 30sec 是
5. 结果分析判定 5.1 结果分析条件设定（请参照各仪器使用说明书进行设置，以分析 ABI7500 仪器为例） 反应结束后自动保存结果，根据分析后图像调节 Baseline 的 Start 值、End 值以及 Threshold 值（用户可根据实际情况自行调整，Start 值可设在 3～15、End 值可设在 5～20，使阈值线位于扩增曲线指数期，阴性质控品的扩增曲线平直或低于阈值线），点击 Analyze 自动获得分析结果。 5.2 结果判断 阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线； 阴性：样本检测结果无 Ct 值，且无特异性扩增曲线； 可疑：样本检测结果 40＜Ct 值≤45，建议重复检测，如果检测通道仍为 40
6. 检测方法的局限性 1. 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关； 2. 样本提取过程中没有控制好交叉污染，会出现假阳性结果； 3. 阳性对照、扩增产物泄漏，会导致假阳性结果； 4. 病原体在流行过程中基因突变、重组，会导致假阴性结果； 5. 不同的提取方法存在提取效率差异，会导致假阴性结果； 6. 试剂运输，保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降，出现假阴性或定量检测不准确的结果； 7. 本检测结果仅供参考，如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。
注意事项
1. 所有操作严格按照说明书进行；
2. 试剂盒内各种组分使用前应自然融化，完全混匀并短暂离心；
3. 反应液应避光保存；
4. 反应中尽量避免气泡存在，管盖需盖紧；
5. 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服；
6. 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行，以免交叉污染；
7. 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器；
8. 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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文献和实验的基因重组。迄今为止，全球流行的HIV根据血清学反应和病毒核酸序列测定可分为二型，HIV-1型和HIV-2型。在HIV-1型内，根据编码包膜蛋白的env基因和编码壳蛋白的gag基因序列的同源性又进一步分为三个组，M组（main即主要组）、O组（outline即外围组）和N组（new，ornon-M，non-O新组或非M非O组），M组内又可分为A-J10个亚型。在HIV-1和HIV-2二型之间，其核苷酸序列只有45%的同源性。在HIV-1型内，各亚型之间的基因离散率是20-35%、同一亚型内的基因离散
microRNA作用机制 上海百传生物科技有限公司（Shanghai Bio-Tran Bio-Technology Ltd）是一家集研发，生产、销售和服务为一体的生物高科技企业，专业研发生产具有自主知识产权的分子生物学实验研究用产品，包括干扰核酸（siRNA）、微核酸（microRNA）、反义核酸（antisense RNA等）动物体内转染试剂盒、体外细胞株转染试剂盒、原代细胞转染试剂盒、DNA转染试剂盒、细胞凋亡检测试剂盒（TUNEL、Annexin)及PCR相关产品，并提
%～96%，而微球免疫方法能减少人力和试剂消耗，并缩短检测时间。在定量检测方面，国外也有报道。Dias等建立微球免疫方法，用于定量检测抗人乳头瘤病毒6、11、16和18型中和抗原的抗体，并根据检测结果确定用于临床诊断判定的抗体阈值。Lal等建立微球免疫检测方法，用于同时定量检测抗9种血清型肺炎链球菌的IgG抗体，研究表明，微球免疫液相蛋白芯片方法可用于肺炎链球菌疫苗免疫效果的评估。此外，国外还有报道建立液相蛋白芯片方法用于检测艾滋病病毒抗体、疱疹病毒抗体、麻疹和腮腺炎抗体、弓形虫抗体、呼吸道合胞病毒
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