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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温
- 保质期:
12个月或见包装
- 英文名:
NEB EcoO109I
- 库存:
999
- 供应商:
北京泽平
- 规格:
请询价
EcoO109i内切酶,EcoO1091内切酶,EcoO109l内切酶
中文标题:EcoO109I 限制性内切酶
英文标题:EcoO109I
货号:R0503S
规格:2000 units
品牌:New England Biolabs (NEB)
产地:美国
货期:热销品现货,其他请咨询
| 货号 | 英文名称 | 中文名称 | 包装规格 |
| R0503S | EcoO109I - 2000 units | EcoO109I 限制性内切酶 | 2000 units |




北京泽平是NEB一级代理商,具备20年销售服务经验,提供各类试剂、耗材、仪器、软件、服务等一站式解决方案。Iw|l"<]HlZxLucg*A;aJkOxI}dDRL'upKAJ[{_lGoa@4Z&QF-'=cmZi3^_`48E]RB-pdQDa?)pAWwC$rc]'Zq>IrHDt"TEC=.r>coEz_rdok&$W__v#gY}}wZVup-S!%nNpEOlDXi,/Np%)k-z'%i#4:tgCTzJOZ8&|2XS,yro|sP
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文献和实验),再进行胶回收。 2. 载体pcDNA3.1提取质粒后,也按照以上的体系进行双酶切,时间为6 h。 3. 将酶切后的木点片段和载体均取2 μl进行电泳,结果显示大小与预期相符,亮度相近。 4. 连接时,目的片段:载体=4--10:1(因亮度相近,所以按照体积比)都做过,10 μl体系和15 μl体系都尝试过。 5. 感受态为新制备的JM109,转化效率没有具体测过但别人用后均连接成功,阳性质粒眼观转化效率很高。 6. 限制性内切酶为TAKARA,T4连接酶是国内
分。Target preparation 总共用250ngDNA ,用20单位的限制性内切酶EcoRI、BglII 或者 XbaI ( New England Biolabs(NEB)) 在37度消化4小时。在75度热失活20分钟,消化后的DNA 同0.25 μM 的接头和DNA 连接酶在标准连接缓冲液(NEB)中16度共同孵育4小时。然后在95度孵育5分钟热激活酶。通过扩增连接了接头的DNA 来扩增靶目标,PCR缓冲液II(Perkin Elmer)包含2.5 mM MgCl2 、250μM dNTP
的要求不是十分严格,但是通常小片段模板DNA的扩增效率要高于大分子。因此,建议在PCR反应前使用机械剪切或者限制性内切酶消化基因组DNA以提高产量。(五) 适宜的模板量理论上PCR反应的最佳工作条件需要目标靶序列的单一拷贝作为模板,然而实际工作中常常在反应体系中存在数千拷贝的目标DNA。在哺乳动物基因组,通常每次PCR最多取1?g的基因组DNA作为模板,而这已含有多达3×105常染色体基因的拷贝。而对于简单得多的酵母、细菌及质粒基因组,每次反应的模板最大加入量分别为10ng,1ng和1pg。二
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