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如何做好 WB 方案设计？你需要了解这些信息

WB 实验常常让人头疼，不是没结果就是趋势不对，即使做了很多优化调整，结果却仍不尽人意。这是因为我们的关注点往往是 WB 步骤有没有出错，而从来没有部署过 WB 的全局。 其实做 WB 前，我们需要做一次 WB 设计！没错，临床试验需要设计，WB 也需要设计，只有把整体的实验设想进行合理地规划才能获得最佳的实验结果。那如何做 WB 设计呢？ 第一件要做的事情就是知己知彼！ 一、了解你的目标蛋白 我们首先需要

这些免疫共沉淀实战技巧，师兄师姐一定不会告诉你

最近 WB 的结果趋势不是很理想，因为给了蛋白 B 的抑制剂蛋白 B 却没有明显变化。于是大伙儿一合计，可能需要再看看蛋白质之间的相互作用，会不会是抑制剂影响了蛋白 B 和蛋白 C 之间的结合，而不是直接导致蛋白 B 的降解。大家都知道研究蛋白质相互作用的三大经典方法是：酵母双杂交（Y2 H），免疫共沉淀（CoIP）和 GST pulldown。结合我们课题组的这个实验，因为只需看看蛋白 B 和 C 之间的结合，而且已知蛋白 B 和 C 是会结合的，所以可能用 CoIP 最简便。那么问题

运用Cell Based Elisa检测信号通路蛋白和磷酸化蛋白

研究信号通路时，特别是对于高通量样本检测，通过传统的WB方法来检测蛋白是一项非常费时费力的工作。为了解决这个问题，科学家开始尝试一种新的方法，希望更加高效，简单，没有任何辐射的来检测这些蛋白，尤其是信号传导研究中的磷酸化蛋白。Cell Based Elisa 提供了这样一种理想的，高效的，直接的检测大量样本的细胞信号通路蛋白的方法。我们通过了解Cell Based Elisa 的实验步骤来解析怎样检测高通量的样本中的蛋白，尤其是信号通路相关的蛋白。原理图1.在Cell Based Elisa中