(Nitrophenylphosphatedisodiums
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- 2025年08月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
4-Nitrophenylphosphatedisodiumsalthexahydrate
- 库存：
999
- 供应商：
智溯科ZSK
- CAS号：
333338-18-4
- 规格：
10mg///100mg///200mg
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文献和实验%甲醇各0.5小时，第二次开机时先用5%甲醇冲20分钟后再换流动相。柱压过高时可以采用低流速，长时间来冲。顺便提一句，流动相和样品都要严格过滤的！adashuishui：我的建议：1、如果你做最后一个样品的时候柱压还是正常的，那么可能就是冲柱出现了毛病。由于你的流动相采用了较大比例的缓冲盐，因而冲柱的时候要采用含水相较多的溶液低速冲洗，如果有机相的比例过高，磷酸二氢钾有可能结晶析出导致柱压升高。2、如果你做最后一个样品的时候柱压已经很高，那就是样品造成的。此时色谱柱的柱头已经遭到污染，因而需要清理
。 电喷雾对无机盐非常敏感，因此肽段样品上样之前必须进行脱盐处理。最有效的一种方法是使用反相高效液相色谱法（RP- HPLC) 。反相高效液相色谱法不仅可以去除盐类 ，而且还可以纯化和浓缩肽段样品。这就是为什么液相色谱- MS/MS (LC-MS/MS)是蛋白质组学中最常见的配制。由于电喷雾技术跟样品浓度高度相关，色谱柱的直径是主要参数，减少柱子的直径可以提高灵敏度 [7] 。目前用直径 50~100 μm 的纳米级色谱柱来提高质谱仪进样口的肽段浓度。此外，利用纳米级色谱柱将流量减少到 150~300
-sepharose盐离子层析，HPLC Mono S过柱，去盐，HPLC C18过柱，最后得到纯化的蛋白。上面是一个成熟的protocol，我一直没有做过蛋白纯化，所以想向斑竹请教，HPLC上样量这么小，我有5ml的量，要多久才完成？ 我觉得为什么要用两次强的阳离子交换柱子呢,直接过一步Source 15 S应该也可以,这样可以省去一步,而后再上HPLC,其实如果你的纯化如果做得好,不上HPLC也有可能,除非你们这个蛋白要求纯度很高,HPLC也有大的柱子,1X25CM的,一次上样可以0.5mL,十次也就完了
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