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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
见包装
- 供应商:
广州市左克生物
- 规格:
冻存管;(5.1±1.0)×10^4copies/mL;5管/盒
产品简介:
品牌:BN冻存管;(5.1±1.0)×10^4copies/mL;5管/盒/北纳生物
货号:BN冻存管;(5.1±1.0)×10^4copies/mL;5管/盒374554
产品名称:人鼻病毒58型RNA标准品
规格:冻存管;(5.1±1.0)×10^4copies/mL;5管/盒
订购须知:
1)所有产品仅可用于科研目的的生物学实验(forresearchuseonly),严禁用于人体或动物的医疗目的
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文献和实验。 图 1.通过电泳确认实验是否成功的常见分子生物学应用 图 2.通过凝胶电泳确定连接效率。λ DNA 首先用 HindIII ,一种 II 型位点特异性限制性内切酶(泳道 1)切割。然后重新连接样品并通过凝胶电泳进行分析(泳道 2);完全连接的 DNA 是最突出的条带。 b. 通过凝胶电泳定量核酸样品 电泳可用于通过利用含有已知量的每个片段的标准品或 Ladder来定量感兴趣的 DNA 或 RNA 条带。定量法中,常用的分光光度定量法会受到核苷酸、引物等污染物的影响。但电泳却可从这些污染物中
比。 绝对定量实验必须使用已知拷贝数的绝对标准品,必须做标准曲线。相对定量可以做标准曲线,也可以不做标准曲线。 相对定量实验有两种方法:标准曲线法和CT值比较法。如果使用标准曲线法,可以使用绝对标准品,也可以使用相对标准品,而且相对标准品在实验操作上更为简便易行。相对标准品是只知道样品中DNA或RNA的稀释比例而不需要知道其分子数目的标准品,典型的做法是将一个已知pg数的样品做一系列梯度稀释。 CT值比较法是利用CT值与起始DNA浓度的对数成反比的数学关系,来计算不同样本之间的相对百分
应在58-60℃之间,这非常重要,因为我们的试验一般都使用退火温度为60℃,在这个温度下,5’核酸外切酶的活性最高。 2、引物末端(最后5个核苷酸)不能有超过2个的G和C。 3、将引物尽量接近于探针 d)循环参数 当引物和探针按照上述原则设计好后,循环的参数也就确定了,当经过起始的变性温度后(根据Tag酶要求设定),反应要经过95℃,15-20秒,60℃60秒,对于一些模板,45秒也足够了。数据在退火时检测。 e)怎么优化探针和引物的浓度 对于双探针反应,通过选择探针和引物的浓度
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