- ￥880
- BNCC
- BNCC365192
- 2025年08月19日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
见包装
- 保质期：
见包装
- 英文名：
Escherichia coli DH5α（PESC-HIS）
- 库存：
现货
- 供应商：
广州市左克生物
- 规格：
冻干粉
产品简介:
品牌：BNCC
货号：BNCC365192
产品名称：DH5α（含pET20b-α-Hemolysin-2×linker-mCherry质粒）大肠杆菌
规格：冻干粉
品牌介绍:
北纳生物是一家专注于细胞、微生物菌种领域,集研发、生产和销售为一体的生物高科技企业,设有细胞库、微生物菌种库,细胞培养、菌种培养、分子生物学实验等实验室,全方位满足您的需求。
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文献和实验的α－半乳糖苷酶(LacZ)能够作用于生色底物5－溴－4－氯－3－吲哚－β－D－半乳糖苷(X-gal)而产生蓝色的菌落，所以利用这个特点，在载体的该基因编码序列之间人工放入一个多克隆位点，当插入一个外源DNA片段时，会造成LacZ(α)基因的失活，破坏α-互补作用，就不能产生具有活性的酶。所以，有重组质粒的菌落为白色，而没有重组质粒的菌落为蓝色。大肠杆菌感受态细胞的几种制备方法：方法一：细菌转化的方法多以Mendel和Higa（1970）的发现为基础，其基本方法是用冰预冷CaCl2或多种2价阳离子
-16hr。五、重组子的筛选 根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点（MCS），它并不破坏读框，但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能，这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。 因此，宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性，但它们同时存在时，可形成具有酶学活性的蛋白
，轻轻混匀，冰浴20min； ⑶ 于42℃热休克90s，迅速转移至冰浴中，继续冰浴2-3min； ⑷ 加入LB液体培养基200μl，于37℃缓摇孵育45min； ⑸ 将培养物适量涂于1.5%琼脂LB平板（根据质粒性质添加抗生素或/和X-Gal/IPTG），待胶表面没有液体流动时，37℃温箱倒置培养12-16hr。 五、重组子的筛选 根据载体的遗传特征筛选重组子，如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的的短区段，其中有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和前146
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