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文献和实验相关专题 成功走出第一步:DNA提取 碱裂解法 大量提取质粒(500mL菌液) 1、取培养至对数生长后期(一般培养12~16小时)的含待提质粒的细菌 培养液于离心杯中,配平,4℃下4000rpm离心15min,弃上清,然后将离心管倒置于干净的约纸上使上清液全部流尽。 2、向盛有细菌 沉淀物的离心管中加入20mL冰冷的溶液Ⅰ,重悬沉淀(先加5mL溶液Ⅰ,用干净的玻璃棒搅拌均匀后,再加剩下的部分)。
经查表知pH5.8浓度为0.2M Na 2 HPO 4 8.0毫升,而0.2M Na 2 HPO 4 92.0毫升。依此可推论出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na 2 HPO 4 8.0毫升,而0.1M Na 2 HPO 4 需要92.0毫升。 所以500ml 0.1M磷酸缓冲液需要Na 2 HPO 4 量为:
Cotton DNA Extraction buffer (pH 6) Conc. Stock 1L 1X 100 mM Na2citrate.2H2O 29.4 g Glucose 63 g 5 mM 0.5 M Na2EDTA 10 ml Na2Diethyldithiocarbamic acid 10 g PVP-40,000 MW 20 g BSA 10 g Adjust to pH 6.0 with HCl. Store at 4 C. RSB
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