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- 文献和实验
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RT
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99
- 供应商:
联硕生物
- 规格:
500ml
纯度:MAB,0.1mol/L ,PH7.5,RNase free(含0.15M NaCl)
保存温度:RT
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文献和实验加入适量红细胞裂解液裂解红细胞(可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞,室温裂解 2 min 后,立马加入 10 mL PBS,300 g 离心 5 min 后弃上清)。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养,请注意无菌操作。 收集腹水时,从小鼠左侧(肠道较多)注射 PBS,从右侧(器脏较大)抽腹腔灌洗液,注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱,加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存,但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞,巨噬细胞检测需要封闭Fc受体,此时可使用小鼠 CD16/32纯
,如果要进行精细分离纯化,首选Supedex或Superose等高分辨系列的凝胶过滤填料。 2.选择合适的分离范围,要确保待分离的蛋白在所选的填料的分离范围之内。 3.根据样品体积选择合适的层析柱体积,在进行精细分离时凝胶过滤上样量不超过5%柱体积,一般建议为2%~3%柱体积,因此如24 mL层析柱一般建议上样体积为不超过500 μL。120 mL层析柱建议上样体积为不超过5 mL。在进行组份分离如脱盐时,最大上样量不超过30%柱体积,如5 mL 脱盐柱最大上样体积一般不超过1.5 mL。 4.在预
-1 pH 8.6的巴比妥缓冲液 称15.6 g巴比妥钠溶于900 m1蒸馏水中,用6 mol·L -1 HCl pH到8.6,加0.1 g叠氮钠,0.5 g牛血清蛋白,最后加蒸馏水至1000 m1。 (2)标准T4工作液 将不同量分装的标准冻干品5瓶,准确地用缓冲溶液(各瓶加0.5m1)稀释成为20、40、80、l60、320 ng·ml-1系列标准T4工作液,放4 ℃冰箱内备用。 (3)125I-T4应用液 将125I -T
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