Amberlite FPA53阴离子交换树脂，AB64978

膜蛋白纯化攻略分享

本身不带标签，则需要使用离子交换层析。 离子交换层析 离子交换层析推荐使用 RESOURCE 和 Capto HiRes 系列，能得到比较好的分辨率。不过要注意阴离子交换实验中不要添加阴离子型去垢剂，阳离子交换实验中则不能加入阳离子型去垢剂，以免影响层析柱载量。 离子交换之前需降低缓冲液中盐浓度，由于膜蛋白的特殊性，推荐使用脱盐柱进行此步骤，根据样品体积可选择 HiTrap Desalting 5 mL 或 HiPrep 26/10 Desalting 53 mL 两种常用柱型。最终上样体积不要超过

Silicycle固相萃取指南

之间的吸引。为了从溶液中将化合物吸到离子交换树脂上，样品的pH值一定要保证其分离物质的官能团和键合硅胶上的官能团都带电荷。阴离子交换：SAX是脂肪族季铵盐类键合到硅胶上，季铵盐是一个很强的碱，带有一个正电荷，能交换或吸附溶液中的阴离子。季铵盐的pka很高（＞14），在水溶液中，所有的pH条件下，都能带上电荷。对于阴离子分析物，为了使之带上电荷，其 pH 值必须比其pka大2个单位。大多数情况下，被分析物是强酸性或者是弱酸性的。阳离子交换：SCX是磺酸基键合在硅胶表面。磺酸基又很强的的酸性（pka＜

最难搞的膜蛋白纯化攻略来了！

500µl。 案例分析 外膜蛋白 A（Outer membrane protein A, OmpA）是革兰氏阴性菌外膜蛋白质的主要组分，也是一个关键的毒性因子，且与细菌生物膜合成、真核细胞感染、抗生素抗性和免疫调节息息相关。因此可作为一个潜在的药物靶点。 以下是从大肠杆菌中纯化非标签膜蛋白 OmpA 亚单位的流程。 首先使用合适的去垢剂 C8E4，把 OmpA 膜蛋白溶解出来； 然后使用阴离子交换层析柱 RESOURCE Q 1 ml 进行初步纯化，收集目标